Anticorpo Monoclonal Anti-Humano CD59 para Citometria de Fluxo (CF) - P13987

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD59

• CD59, também conhecido como protecina, proteína inibidora do MAC (MAC-IP) e fator de restrição homóloga de 20 kDa (HRF20), é uma glicoproteína ancorada por GPI que atua como um regulador crítico do complemento.
• Ele funciona como um potente inibidor do complexo de ataque à membrana (MAC), ligando-se aos componentes C8 e C9 e prevenindo a formação do poro citolítico. Referências relacionadas: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• O CD59 é amplamente expresso em células humanas, ancorado à membrana plasmática por meio de uma porção glicosilfosfatidilinositol (GPI), e protege as células hospedeiras da lise mediada pelo complemento autólogo.
• Uma forma solúvel, encontrada na urina, mantém a capacidade de ligar o complemento, mas exibe atividade inibitória do MAC muito reduzida em comparação com a isoforma ligada à membrana.
• A proteína sofre modificações pós-traduccionais, incluindo formação de pontes dissulfeto, glicação e glicosilação N-ligada; mutações estão associadas à anemia hemolítica hereditária.
• O splicing alternativo gera múltiplas variantes de transcripto, e a proteína foi identificada por meio de sequenciamento direto de proteínas e proteômica em larga escala.
• Subcelularmente, o CD59 se localiza na membrana celular e também é secretado, contribuindo para a evasão imunária e sinalização além da inibição do complemento.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 26–101 do CD59 humano, que corresponde ao domínio extracelular maduro; espera-se que o anticorpo reconheça o CD59 nativo ligado à membrana. Considere usar um controle de isotipo pareado para experimentos de citometria de fluxo.
• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo conjugado com em células mononucleares de sangue periférico humano (PBMCs) ou linhas de células que expressam CD59 para determinar a concentração ótima de coloração.
• O CD59 é ancorado por GPI; evite tratamentos que podem liberar proteínas ancoradas por GPI (ex.: fosfolipase C), a menos que esteja avaliando especificamente a dependência da âncora. Valide no sistema de amostra relevante.
• A reatividade cruzada é reportada apenas para humanos; se trabalhar com modelos não humanos, valide a especificidade e reatividade antes do uso.

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