Anticorpo Monoclonal Anti-IFN-gama Humano para Citometria de Fluxo (Intracelular) - P01579

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IFN-gama

• O interferão gama (IFN-gama), também conhecido como interferão imunológico, é uma citocina de interferão tipo II que desempenha papéis centrais nas respostas imunes antimicrobianas, antivirais e antitumorais.
• É produzido principalmente por linfócitos T ativados e células NK após estimulação imunológica. Referências relacionadas: PMID:16914093 PMID:8666937
• O IFN-gama sinaliza através da via JAK-STAT após se ligar ao seu receptor IFNGR1, levando à ativação de STAT1, translocação nuclear e transcrição de genes alvo a jusante. Referências relacionadas: PMID:8349687 PMID:16914093
• Ele aumenta a apresentação de antígenos ao induzir subunidades do imunoproteassoma e o ativador PA28, aumentando assim a quantidade, qualidade e repertório de peptídeos para carga no MHC de classe I. Referências relacionadas: PMID:8666937 PMID:8163024 PMID:11112687
• O IFN-gama up-regula os complexos MHC de classe II ao promover a expressão de catepsinas B, H e L, moléculas chave para o processamento de antígenos. Referências relacionadas: PMID:7729559
• Participa da regulação das células-tronco hematopoiéticas durante o desenvolvimento e em condições homeostáticas, afetando sua quiescência e diferenciação.
• Localização subcelular: Secretada.
• Palavras-chave: Defesa antiviral, Citocina, Glicoproteína, Farmacêutico, Estrutura 3D.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde à sequência madura da proteína IFN-gama (aa 24-166), o que sugere que o anticorpo pode reconhecer tanto o IFN-gama humano endógeno quanto o recombinante. Recomenda-se validar o desempenho no seu tipo de amostra específico e nas condições do seu ensaio.
• Para citometria de fluxo intracelular (FC intra), os protocolos típicos envolvem estimulação celular com PMA/ionomicina na presença de um inibidor de transporte de proteínas (por exemplo, Brefeldina A), seguido de fixação e permeabilização. Otimize o tempo de estimulação e a concentração do anticorpo para obter uma relação sinal-ruído ideal.
• Realize a titulação do anticorpo de 0,1 a 1 µg por ensaio para determinar o índice de coloração ideal. Inclua controles não estimulados e de isotipo para avaliar o ruído de fundo e a especificidade.
• Este produto é fornecido em formato líquido com envio em bolsa de gelo; após o recebimento, alíquota e armazene conforme recomendado para manter a estabilidade.

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