Anticorpo Monoclonal Anti-IgD Humano para WB, FC, ELISA - P01880

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IgD

• A região constante pesada delta da imunoglobulina (IgD) é a região constante das cadeias pesadas delta da imunoglobulina, existindo como glicoproteínas ligadas à membrana (mIgD) ou secretadas (sIgD). Cada molécula de IgD possui dois sítios de ligação ao antígeno formados pelos domínios variáveis de uma cadeia pesada e uma cadeia leve.
• IgD atua como o principal isotipo de receptor de antígeno na superfície da maioria das células B periféricas, coexpresso com IgM. A ligação do antígeno ao mIgD desencadeia a ativação das células B, expansão clonal e diferenciação, além de induzir a fosforilação de CD79A/CD79B por quinases Src. Referências relacionadas: PMID:20176268, PMID:22158414
• As regiões variáveis da IgD são geradas por recombinação V(D)J e podem sofrer mutação somática, permitindo a maturação da afinidade após o encontro com o antígeno. Referências relacionadas: PMID:17576170, PMID:20176268
• IgD solúvel (sIgD) é encontrado no soro em concentrações menores que IgG, IgA e IgM, mas muito maiores que IgE. A ativação das células B reduz a secreção de sIgD.
• IgD é um potente indutor de citocinas pró-inflamatórias como TNF, IL1B, IL6 e IL10 em células mononucleares do sangue periférico, sendo predominantemente mediada por monócitos. Referências relacionadas: PMID:10702483, PMID:11282392, PMID:8774350
• IgD é uma glicoproteína com pontes dissulfeto intra e intercadeias. O splicing alternativo gera isoformas, e o peso da proteína da região constante é de aproximadamente 42–47,5 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB): O anticorpo reconhece uma banda de aproximadamente 42–47,5 kDa em condições redutoras. Verifique a expressão em linhas de células B (por exemplo, Ramos ou Daudi) ou células mononucleares do sangue periférico.
• Para citometria de fluxo (FC): Realize a coloração de superfície em células B humanas viáveis; a fixação e permeabilização podem ser necessárias para a detecção intracelular de sIgD em células ativadas.
• Para ELISA: Use como anticorpo de captura ou detecção em formatos de ELISA sanduíche para quantificação de IgD humana; garanta a especificidade contra outros isotipos de imunoglobulina por meio de teste cruzado.
• O imunógeno cobre a região constante (aa 99-384), o que indica que o anticorpo detecta todas as isoformas de IgD que compartilham essa sequência. Considere realizar a validação no sistema de amostra e na aplicação relevantes, pois as condições podem variar.

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