Anticorpo Monoclonal de Coelho contra a Cadeia Leve Kappa Humana para WB, IF-P, FC, ELISA - P01834

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Cadeia Leve Kappa Humana

• A região constante da imunoglobulina kappa (IGKC) é a parte constante da cadeia leve nos anticorpos. Ela se emparelha com um domínio variável para formar a cadeia leve completa e se associa com uma cadeia pesada para constituir o monômero de imunoglobulina.
• As imunoglobulinas são glicoproteínas ligadas à membrana ou secretadas produzidas por linfócitos B. As formas ligadas à membrana atuam como receptores que, após a ligação ao antígeno, disparam a expansão clonal das células B e sua diferenciação em células plasmáticas secretoras de anticorpos. Os anticorpos secretados mediam a fase efetora da imunidade humoral, levando à eliminação do antígeno. Referências relacionadas: PMID:20176268 PMID:22158414
• O sítio de ligação ao antígeno é formado pelos domínios variáveis de uma cadeia pesada e uma cadeia leve. Esses domínios variáveis são gerados por recombinação V-(D)-J e podem sofrer mutação somática, permitindo a maturação da afinidade após a exposição ao antígeno. Referências relacionadas: PMID:17576170 PMID:20176268
• A região constante kappa está presente tanto em anticorpos secretados quanto como parte do receptor de célula B ligado à membrana (BCR). Suas localizações subcelulares incluem o espaço extracelular (na forma secretada) e a membrana plasmática.
• Estruturalmente, a região constante contém resíduos de cisteína conservados que formam uma ponte dissulfeto intrachain, típica da dobra do domínio de imunoglobulina. O peso molecular teórico é de ~11,8 kDa (UniProt), consistente com os 12 kDa observados em SDS-PAGE.
• A IGKC é altamente conservada entre os alótipos humanos (alótipos Km) e está envolvida na imunidade adaptativa. Mutações ou desequilíbrios na produção de cadeias leves podem levar a doenças por deposição de imunoglobulinas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região constante kappa humana de comprimento total (aminoácidos 1-107), permitindo amplo reconhecimento de todas as variantes e alótipos da cadeia leve kappa.
• Para Western blot (WB) em condições redutoras, pode ser observada uma banda de ~12 kDa (cadeia leve livre) ou ~25 kDa (cadeia pesada + cadeia leve). Valide o padrão de bandas específico no tipo de sua amostra.
• Na imunofluorescência indireta (IF-P), utilize protocolos adequados de fixação e inclusão. O anticorpo detecta a região constante, portanto tanto a cadeia leve kappa de superfície quanto intracelular pode ser visualizada.
• Para citometria de fluxo (FC), garanta controles de isotipo adequados e titule o anticorpo para obtenção de coloração ótima de células da linhagem B humana ou amostras contendo imunoglobulinas humanas.
• Para ELISA, o formato monoclonal de coelho oferece desempenho consistente entre lotes; o anticorpo pode atuar como componente de detecção ou captura em ensaios de quantificação de anticorpos humanos.

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