Anticorpo Monoclonal Anti-LAMP2 Humano para Citometria de Fluxo Intracelular - P13473

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da LAMP2

• A LAMP2 é uma glicoproteína de membrana lisossomal fortemente glicosilada que contém uma ligação dissulfeto e pertence à família LAMP.
• Atua como inibidor direto do canal de prótons lisossomal TMEM175, regulando assim o pH do lúmen lisossomal e permitindo a atividade ótima das hidrolases. Referências relacionadas: PMID:37390818
• É um receptor crítico para a autofagia mediada por chaperonas (AMC), ligando substratos reconhecidos por chaperonas citosólicas (ex.: GAPDH, GPX4, NLRP3) e direcionando-os para degradação lisossomal. Referências relacionadas: PMID:11082038 PMID:18644871 PMID:24880125 PMID:36586411
• É necessária para a fusão autofagossomo-lisossomo; células sem LAMP2 não conseguem recrutar STX17 para os autofagossomos, impedindo a degradação da carga autofágica. Referências relacionadas: PMID:27628032
• Facilita a apresentação eficiente de antígenos exógenos por MHC de classe II ao permitir a degradação de proteínas lisossomais, embora não seja necessária para a apresentação de antígenos endógenos. Referências relacionadas: PMID:15894275 PMID:20518820
• Apoia a clivagem mediada pela FURINA da proteína de fusão F do vírus da caxumba, ao interagir tanto com a FURINA quanto com a proteína viral não processada.
• Sofre splicing alternativo para produzir três isoformas (LAMP-2A, -2B, -2C) com distribuições teciduais distintas; LAMP-2A é abundante em placenta/pulmão/fígado, enquanto LAMP-2B é amplamente expressa, e LAMP-2C está enriquecida no trato digestivo e cérebro. Referências relacionadas: PMID:26856698 PMID:7488019
• Localiza-se principalmente nas membranas do lisossomo, endossomo e autofagossomo, e também pode ser detectada na superfície celular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio luminal (aminoácidos 29-375) da LAMP2 humana; o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo extracelular/luminal acessível após permeabilização.
• Para citometria de fluxo intracelular, certifique-se de realizar fixação e permeabilização adequadas otimizadas para o conjugado para manter o sinal de fluorescência.
• A LAMP2 é expressa em muitos tipos de células; considere incluir controles positivos (ex.: HeLa, Jurkat) e negativos apropriados para confirmar a especificidade no seu sistema experimental.
• Se for necessária reatividade entre espécies, valide o anticorpo nas amostras não humanas relevantes, pois a reatividade cruzada pode depender da conservação do epítopo.
• Ao combinar a detecção de LAMP2 com outros marcadores lisossomais, verifique a compatibilidade dos protocolos de fixação e permeabilização para preservar a antigenicidade e a integridade do corante.

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