Anticorpo Monoclonal Anti-Humano LILRA2/CD85h para IF/ICC, FC - Q8N149

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de LILRA2/CD85h

• LILRA2 (leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 2), também referido como CD85h, ILT-1 e LIR-7, é uma proteína de membrana de passagem única do tipo I que pertence à superfamília das imunoglobulinas. Múltiplas isoformas proteicas são produzidas por splicing alternativo, com pesos moleculares relatados de aproximadamente 47–53 kDa.
• Como receptor imune inato, LILRA2 reconhece especificamente imunoglobulinas com terminação N truncada, geradas por clivagem proteolítica por várias bactérias e fungos patogênicos, incluindo L. pneumophila, M. hyorhinis, S. pneumoniae, S. aureus e C. albicans. Esse reconhecimento desencadeia a ativação de neutrófilos e a liberação de mediadores inflamatórios por monócitos e eosinófilos. Referências relacionadas: PMID:12529506 PMID:27572839 PMID:22479404
• O receptor se liga a um subconjunto de moléculas de IgM, IgG3 e IgG4 clivadas, mas não interage com IgA1 clivada ou antígenos MHC de classe I, indicando especificidade por certas imunoglobulinas modificadas por patógenos. Referências relacionadas: PMID:27572839 PMID:19230061
• Após o acoplamento ao ligante em monócitos, LILRA2 reduz a regulação das respostas ao lipopolissacarídeo bacteriano (LPS), provavelmente diminuindo a expressão e a sinalização de TLR4, e induz a secreção de CSF2, CF3, IL6, CXCL8 e CCL3. Referências relacionadas: PMID:22479404
• Em eosinófilos, a ativação do receptor promove a liberação de RNASE2, IL4 e leucotrieno C4, amplificando ainda mais as cascatas inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:12529506
• LILRA2 é detectado predominantemente na superfície de monócitos, neutrófilos, basófilos e eosinófilos do sangue periférico, com expressão muito baixa ou ausente em células T, células B, células dendríticas e células NK. Referências relacionadas: PMID:12529506 PMID:22479404 PMID:9548455
• A proteína é anotada com várias características estruturais e funcionais chave, incluindo peptídeo sinal, domínios semelhantes a imunoglobulina, pontes dissulfeto, glicosilação N-ligada e nitração de tirosina; uma isoforma secretada também foi descrita.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno cobre toda a região extracelular, o anticorpo provavelmente reconhece LILRA2 nativo expresso na superfície, tornando-o adequado para coloração de células vivas em citometria de fluxo e imunofluorescência.
• Para IF/ICC, condições adequadas de fixação e permeabilização devem ser otimizadas para preservar a acessibilidade do epítopo, especialmente para detecção intracelular ou ligada à membrana.
• Dado o perfil de expressão relatado, considere incluir controles apropriados usando tipos celulares com expressão conhecida (por exemplo, monócitos do sangue periférico, neutrófilos) e aqueles com expressão baixa/ausente (por exemplo, linfócitos) para verificar a especificidade.
• O fluoróforo conjugado é compatível com canais padrão de detecção de fluorescência vermelha; sempre proteja da luz durante o processamento.
• Para FC, titule o anticorpo para determinar a concentração de coloração ideal para o seu tipo de amostra específico, para minimizar o ruído de fundo e maximizar a relação sinal-ruído.
• Como o anticorpo é validado apenas para IF/ICC e FC pelo fornecedor, o desempenho em outras aplicações (por exemplo, western blotting) deve ser verificado independentemente, especialmente devido às múltiplas isoformas e glicosilação potencial de LILRA2.

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