Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Pro-Colágeno I alfa Humano (COL1A1) para WB, IF-P, IHC-P - P02452

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Cadeia alfa-1(I) do Colágeno

• A cadeia alfa-1(I) do colágeno, codificada por COL1A1, é a cadeia pro-alfa1(I) que se associa à pro-alfa2(I) para formar o pró-colágeno tipo I, o principal colágeno fibrilar da matriz extracelular.
• O colágeno tipo I é um colágeno do grupo I, formando fibrilas que conferem resistência à tração aos tecidos conjuntivos; é mais abundante em tendões, ligamentos e osso.
• A proteína é secretada no espaço extracelular e sofre mineralização no osso, ligando-se à hidroxiapatita de cálcio para contribuir para a resistência óssea.
• Modificações pós-traducionais extensas, incluindo hidroxilação de resíduos de prolina e lisina, glicosilação e fosforilação, são essenciais para a estabilidade da tripla hélice e montagem das fibrilas.
• Mutações em COL1A1 estão ligadas à osteogênese imperfeita (doença dos ossos de vidro), síndrome de Ehlers-Danlos, osteoporose e nanismo, refletindo seu papel estrutural crítico.
• A proteína madura contém repetições características Gly-X-Y e um pró-peptídeo C-terminal com ligações dissulfeto, com um peptídeo sinal que direciona a secreção.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região N-terminal (aa 26-161) do COL1A1 humano, direcionando-se ao domínio do pró-peptídeo; considere que esta região pode ser clivada em fibrilas de colágeno maduras, potencialmente afetando a detecção de formas totalmente processadas.
• Para western blot (WB), o peso molecular previsto é ~138 kDa; devido às extensas reticulações e modificações pós-traducionais, o peso molecular observado pode variar; valide no seu sistema de amostra usando controles positivos apropriados (por exemplo, lisados de fibroblastos humanos ou extratos ósseos).
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF-P), otimize os protocolos de recuperação antigênica e permeabilização para expor epítopos dentro da densa matriz extracelular; considere a digestão enzimática para melhorar a penetração do anticorpo.
• Este anticorpo é validado para reatividade humana; a reatividade cruzada com outras espécies não é caracterizada; se usar amostras não humanas, realize um experimento piloto para confirmar a reatividade.

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