Anticorpo Monoclonal Anti-Humano TrkA () para Citometria de Fluxo - P04629

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de TrkA/NTRK1

• O TrkA (receptor de fator de crescimento nervoso de alta afinidade) é um receptor tirosina quinase que se liga ao NGF como seu ligante primário, sofrendo homodimerização e autofosforilação após a ligação do ligante, iniciando cascatas de sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:1281417
• O receptor é crucial para o desenvolvimento, maturação e sobrevivência de neurônios simpáticos e sensoriais, regulando a proliferação, diferenciação e apoptose através de vias de sinalização distintas.
• Após a ativação, o TrkA recruta e fosforila proteínas adaptadoras como SHC1, FRS2, SH2B1, SH2B2 e PLCG1, levando à ativação das vias Ras-MAPK, PI3K-AKT e NF-κB, que controlam a sobrevivência e diferenciação celular. Referências relacionadas: PMID:15488758, PMID:17196528
• O splicing alternativo produz três isoformas: TrkA-I (amplamente expressa em tecidos não neuronais), TrkA-II (principalmente em células neuronais) e TrkA-III (específica para células-tronco neurais e progenitores da crista neural), que exibe atividade oncogênica quando superexpressa.
• O TrkA localiza-se principalmente na membrana celular e circula através de endossomos iniciais, tardios e de reciclagem, consistente com seu papel no tráfego de receptores e modulação de sinal.
• O receptor contém motivos estruturais característicos, incluindo domínios semelhantes a imunoglobulinas, repetições ricas em leucina e um domínio tirosina quinase, e está sujeito a modificações pós-traducionais, como fosforilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 33–407) do TrkA humano, sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo na região de ligação ao ligante, potencialmente adequado para detectar populações de receptores tanto ligados à membrana quanto internalizados.
• Para citometria de fluxo (FC), recomenda-se titular o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para seu tipo de célula específico e condições experimentais.
• Considere usar linhagens celulares de controle positivo e negativo apropriadas (por exemplo, linhagens celulares neuronais ou cancerígenas que expressam TrkA) para validar a especificidade da coloração.
• Se estiver detectando níveis totais de receptor (superfície mais intracelular), inclua uma etapa de permeabilização; para detecção apenas de superfície, use um protocolo de não permeabilização.

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