Anticorpo Monoclonal Anti-Huntingtina para WB, IF-F, ELISA - P42858

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Huntingtina

• A Huntingtina, também conhecida como proteína da doença de Huntington (proteína HD), é codificada pelo gene HTT (também designado HD ou IT15) e é amplamente expressa, com níveis mais altos no cérebro.
• É uma proteína grande de ~348 kDa que pode desempenhar um papel no transporte mediado por microtúbulos e na função vesicular, promovendo a formação de vesículas autofágicas.
• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo, endossomos iniciais e autofagossomos, refletindo seu envolvimento no tráfego intracelular e na autofagia.
• No cérebro, a huntingtina é encontrada principalmente no córtex cerebelar, neocórtex, estriado e formação hipocampal, localizando-se em fibras nervosas, varicosidades e terminações nervosas.
• Mutações envolvendo uma expansão da repetição do tripleto CAG no gene HTT levam à doença de Huntington, um distúrbio neurodegenerativo autossômico dominante caracterizado por sintomas motores, cognitivos e psiquiátricos.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, miristoilação, fosforilação e conjugação de ubiquitina, que podem regular sua função e interações.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como um anticorpo monoclonal de coelho, oferece alta especificidade e consistência entre lotes para resultados reproduzíveis.
• O imunógeno é um peptídeo sintético dentro da região N-terminal (aa 1-100), garantindo o reconhecimento da proteína huntingtina de comprimento total.
• Para Western blotting, use um gel de baixa porcentagem (por exemplo, 6-8%) para resolver a grande proteína de ~348 kDa; verifique a eficiência da transferência com marcadores de peso molecular apropriados.
• Este anticorpo é relatado como validado por KO, indicando especificidade; considere incluir controles de nocaute ou silenciamento apropriados em seus experimentos.
• Para imunofluorescência, otimizar a fixação (por exemplo, PFA a 4%) e a permeabilização (por exemplo, Triton X-100 a 0,1%) pode melhorar a detecção da huntingtina nos compartimentos citoplasmáticos e nucleares.
• Valide a reatividade cruzada em suas amostras específicas, pois a reatividade cruzada entre espécies (humano, camundongo, rato) é baseada em dados do fornecedor; teste sob suas condições experimentais.
• Aplicações de ELISA podem exigir o emparelhamento com um anticorpo de captura ou detecção; avalie diferentes combinações e condições de revestimento.

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