Anticorpo policlonal anti-Huntingtina para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42858

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Huntingtina

• A proteína Huntingtina (HTT), também conhecida como proteína HD ou IT15, é codificada pelo gene HTT e constitui o principal foco das pesquisas sobre a doença de Huntington.
• A Huntingtina é uma proteína grande, com 348 kDa, que pode desempenhar um papel no transporte mediado por microtúbulos ou na função das vesículas.
• Ela promove a formação de vesículas autofágicas, contribuindo para as vias de degradação e reciclagem celular.
• A localização subcelular inclui o citoplasma, o núcleo, o endossomo inicial e os autofagossomos, indicando um tráfego dinâmico.
• No cérebro, a Huntingtina é altamente expressa no córtex cerebral, estriado, córtex cerebelar e formação hipocampal; também é encontrada em fibras nervosas, varicosidades e terminações nervosas.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, miristoilação, fosforilação e ubiquitinação, que podem regular sua função e suas interações.
• Mutações no gene HTT envolvendo a expansão de repetições do trinucleotídeo CAG causam a doença de Huntington, um distúrbio neurodegenerativo.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aa 435-635 da Huntingtina humana (NP_002102.4). Para Western blot, observe o alto peso molecular (~348 kDa); considere usar géis de poliacrilamida de baixa porcentagem e tempos de transferência prolongados para uma detecção ideal.
• Como anticorpo policlonal, ele pode reconhecer múltiplos epítopos; isso pode ser vantajoso para detectar espécies de huntingtina de comprimento completo e truncadas, mas recomenda-se uma validação específica para cada aplicação.
• Para IHC-P e IF/ICC, use cortes cerebrais recém-congelados ou incluídos em parafina como controle positivo, considerando a alta expressão no sistema nervoso central. Valide o padrão de coloração em relação às distribuições subcelulares conhecidas.
• O anticorpo apresenta reação cruzada com amostras de camundongo e rato, mas os níveis de expressão do antígeno e a estabilidade da proteína podem variar entre tecidos e espécies; realize experimentos-piloto para confirmar a adequação.
• Para ELISA, otimize o antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo para obter uma faixa de detecção linear.
• Inclua sempre controles negativos, como tecido de modelos knockout para HTT quando disponíveis, e verifique a especificidade com lisados positivos e negativos conhecidos.

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