Anticorpo Policlonal Anti-HuR/ELAVL1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15717

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de HuR/ELAVL1

• HuR/ELAVL1 é uma proteína de ligação a RNA que reconhece especificamente elementos ricos em AU (AREs) e motivos poli-U nas 3'-UTRs de mRNAs como FOS e IL3, estabilizando-os e aumentando sua tradução. Liga-se preferencialmente à sequência 5'-UUUU[AG]UUU-3'. Referências relacionadas: PMID:14517288, PMID:18285462, PMID:31358969, PMID:14731398, PMID:17632515, PMID:8626503
• Durante a diferenciação de células-tronco embrionárias, HuR liga-se preferencialmente a mRNAs não metilados em m6A, estabilizando-os para promover o programa de diferenciação (Por similaridade).
• HuR também se liga ao mRNA MYC modificado por m6A, contribuindo para a estabilidade do oncogene MYC e capacidade proliferativa (PubMed:32245947). Referências relacionadas: PMID:32245947
• Aumenta a estabilidade do mRNA da leptina via ligação a ARE, ligando-o ao metabolismo energético (PubMed:29180010). Referências relacionadas: PMID:29180010
• HuR faz "shuttle" entre o núcleo e o citoplasma, e localiza-se em grânulos de estresse e corpos-P em resposta ao estresse celular.
• Expresso de forma ubíqua, HuR é detectado no cérebro, fígado, timo e músculo.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e metilação, regulam a função e distribuição subcelular de HuR.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para WB, use lisados celulares totais de linhagens celulares humanas ou de camundongo que expressem HuR (por exemplo, HeLa, HEK293). O tamanho esperado da banda é de aproximadamente 36 kDa. Considere pré-absorver com o peptídeo imunizante para confirmar a especificidade.
• Para IHC-P, valide as condições de recuperação antigênica (tampão citrato ou EDTA) em cortes de tecido humano ou de camundongo conhecidos por expressar HuR, como cérebro ou fígado. Recomenda-se uma etapa de bloqueio para reduzir o fundo.
• Para IF/ICC, otimize os protocolos de fixação (por exemplo, PFA 4%) e permeabilização (por exemplo, Triton X-100 0,1%). O "shuttle" nuclear-citoplasmático de HuR pode ser afetado pelo tratamento celular; inclua controles não tratados.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado tanto em formatos diretos quanto de sanduíche. Emparelhe-o com um anticorpo de detecção que reconheça um epítopo distante para sensibilidade ideal.
• Como HuR está sujeito a modificações pós-traducionais, considere o contexto biológico ao interpretar os resultados; formas modificadas podem migrar de forma diferente no SDS-PAGE.

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