Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ICAM3 para WB, ELISA - P32942

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ICAM3

• O ICAM3 (Molécula de adesão intercelular 3), também designado como CD50 ou ICAM-R, é uma proteína de membrana tipo I de passagem única e membro da superfamília das imunoglobulinas, caracterizada por múltiplos domínios semelhantes a imunoglobulinas e pontes dissulfeto intramoleculares.
• Serve como um ligante primário para a integrina LFA-1 (ITGAL:ITGB2), desempenhando um papel crucial na adesão de células imunes e na fagocitose de neutrófilos apoptóticos por macrófagos. Referências relacionadas: PMID:1448173 PMID:1448174 PMID:23775590
• Além disso, o ICAM3 interage com a integrina ITGAD/ITGB2, expandindo seu repertório de funções de adesão leucocitária. Referências relacionadas: PMID:8777714
• Através de um mecanismo dependente de Ca2+ e independente de integrina, o ICAM3 liga-se ao CD209 em células dendríticas, iniciando o agrupamento de células dendríticas e células T e facilitando a proliferação de células T. Referências relacionadas: PMID:10721994
• Subcelularmente, o ICAM3 localiza-se na membrana plasmática, consistente com seu papel em eventos de contato direto célula-célula.
• Seu padrão de expressão é rigorosamente regulado: presente constitutivamente apenas em leucócitos em repouso e ausente em células endoteliais, mesmo após ativação por citocinas. Referências relacionadas: PMID:8325327 PMID:1448174
• Modificações pós-traducionais, como fosforilação e glicosilação, podem modular as propriedades adesivas e a sinalização do ICAM3.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 270–490 dentro da região extracelular do ICAM3 humano, o que inclui domínios provavelmente envolvidos na ligação ao ligante. Este design pode suscitar anticorpos que reconhecem epítopos nativos; no entanto, a especificidade do anticorpo deve ser confirmada usando controles apropriados (por exemplo, linhagens celulares knockout ou knockdown).
• Para análise de Western blot (WB), recomenda-se o uso de lisados proteicos de linhagens celulares de leucócitos humanos ou leucócitos primários, onde o ICAM3 é abundantemente expresso. Espera-se uma banda em aproximadamente 60 kDa; considere usar um marcador de peso molecular e um controle positivo conhecido.
• Em aplicações de ELISA, a natureza policlonal deste anticorpo permite um emparelhamento flexível (por exemplo, como anticorpo de captura ou detecção) quando combinado com um parceiro monoclonal adequado. Valide a diluição ideal e as condições do tampão no sistema de ensaio alvo.
• Observe que este anticorpo é específico para ICAM3 humano; a reatividade cruzada com ortólogos de camundongo ou rato é improvável com base na homologia de sequência limitada na região do imunógeno. Se estender para outras espécies, verifique o alinhamento de sequência e teste experimentalmente.

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