Anti-ICOS/CD278 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6W8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ICOS/CD278

• ICOS (Coestimulador de Células T Induzível), também conhecido como AILIM e CD278, é um receptor estimulatório expresso em células T ativadas. Pertence à família CD28 de moléculas de coestimulação imune e contém um domínio de imunoglobulina.
• O ICOS desempenha um papel crucial nas respostas de células T ao ligar-se ao seu ligante ICOSL em APCs, entregando sinais de coestimulação que aumentam a proliferação de células T, a secreção de citocinas (por exemplo, IL10) e o auxílio à secreção de anticorpos por células B. Referências relacionadas: PMID:9930702, PMID:33033255
• É crítico para a diferenciação de células T foliculares reguladoras durante desafios imunes, como infecção viral, atuando via sinalização PI3K e modulação do fluxo de cálcio induzido por TCR. Referências relacionadas: PMID:27135603, PMID:30523347
• O ICOS previne a apoptose de células T pré-ativadas e é essencial para interações eficientes entre células T e B e para a troca de classe mediada por CD40 de isotipos de imunoglobulinas.
• Subcelularmente, o ICOS está localizado na membrana celular e também pode ser secretado.
• É altamente expresso em células T tonsilares nos centros germinativos, com níveis mais baixos no timo, pulmão, linfonodo e leucócitos de sangue periférico, mostrando um padrão de expressão específico de tecido.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de ligações dissulfeto, contribuindo para sua estabilidade estrutural.
• O splicing alternativo pode gerar múltiplas isoformas, adicionando diversidade funcional.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 21-140) do ICOS humano, que compartilha alta homologia com camundongo e rato, apoiando a reatividade cruzada.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 23 kDa (às vezes aparecendo como um doublet devido à glicosilação); considere usar lisados de controle positivo de células T ativadas.
• Na imunofluorescência/ICC, a permeabilização pode ser necessária para detecção intracelular; valide a coloração em linhagens de células T, como Jurkat.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como anticorpo de captura ou detecção; considere o pareamento com outros anticorpos ICOS ou proteínas de fusão ICOSL-Fc.
• Sempre inclua controles negativos apropriados (por exemplo, células deficientes em ICOS ou peptídeo de bloqueio) para confirmar a especificidade.
• Considere testar uma faixa de diluições começando de 1:500 para WB e 1:50 para IF, pois os anticorpos policlonais podem variar entre lotes.

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