Anticorpo Policlonais Anti-IDH1 para WB, IF/ICC, ELISA - O75874

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IDH1

• O gene IDH1 codifica a isocitrato desidrogenase citoplasmática [NADP] (IDPc), que catalisa a descarboxilação oxidativa do isocitrato dependente de NADP+ em 2-oxoglutarato, uma reação necessária para enzimas downstream como a fitanoil-CoA dioxigenase. Referências relacionadas: PMID:10521434 PMID:19935646
• A enzima gera NADPH, um cofator essencial para inúmeras vias de biossíntese e defesa antioxidante, ligando-a ao anabolismo celular e à homeostase redox.
• O IDH1 localiza-se predominantemente no citosol e peroxissomos, e também pode atuar como uma cristalina epitelial da córnea para manter a transparência corneana (por similaridade).
• É uma enzima dependente de metais que requer magnésio ou manganês para sua atividade, e está sujeito a acetilação e fosforilação, como revelado por estudos proteômicos.
• Como componente chave do ciclo do ácido tricarboxílico e da rota do glioxilato, o IDH1 está envolvido no metabolismo central do carbono, com mutações somáticas encontradas comumente em gliomas e leucemia mieloide aguda.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região entre os aminoácidos 100–200, que é conservada entre humano, camundongo, rato e macaco; isso suporta a ampla reatividade cruzada entre espécies relatada para western blotting (WB) e imunofluorescência (IF/ICC).
• Para WB, é esperada uma banda em torno de 47 kDa; considere usar condições redutoras e controles de carregamento em lisados de linhas celulares que expressam IDH1 (por exemplo, HeLa, HepG2).
• Em IF/ICC, valide os padrões de localização com marcadores de organelas para confirmar a coloração citosólica e peroxissomal, conforme descrito na literatura.
• Aplicações de ELISA podem exigir otimização do antígeno de revestimento e da diluição do anticorpo; um ELISA direto ou sanduíche com a proteína IDH1 recombinante pode ser usado como controle positivo.
• Observe que o anticorpo é policlonal e pode apresentar variabilidade entre lotes; o desempenho consistente deve ser verificado no sistema experimental relevante.

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