Anti-IDH3A Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P50213

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IDH3A

• O IDH3A codifica a subunidade alfa da isocitrato desidrogenase dependente de NAD mitocondrial, uma enzima chave do ciclo do ácido tricarboxílico (TCA).
• Catalisa a descarboxilação oxidativa do isocitrato a alfa-cetoglutarato, utilizando NAD⁺ como cofator e requerendo íons metálicos bivalentes (Mg²⁺/Mn²⁺) para a atividade.
• A enzima funciona como um heterotetrâmero: duas subunidades alfa combinam-se com uma subunidade beta (IDH3B) e uma subunidade gama (IDH3G) para formar o complexo totalmente ativo; os heterodímeros alfa/beta e alfa/gama exibem atividade basal.
• A proteína localiza-se exclusivamente na matriz mitocondrial, consistente com o seu papel na respiração celular.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, e o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• Mutações no IDH3A estão ligadas à retinite pigmentosa, destacando a importância da integridade do ciclo do TCA para a saúde retiniana.
• Nomes alternativos incluem subunidade alfa da isocitrato desidrogenase e subunidade alfa da ICDH específica para NAD(+).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 28–366 do IDH3A humano, cobrindo uma porção significativa da proteína madura; espera-se que o anticorpo detecte tanto o IDH3A endógeno quanto o recombinante.
• Para western blot (WB), uma banda em torno de 40 kDa (peso molecular previsto de 39,6 kDa) deve ser observada; inclua controles positivos apropriados (por exemplo, lisados de tecido HeLa, HEK293, camundongo/rato).
• Na imuno-histoquímica (IHC‑P), otimize as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato, pH 6,0) e valide a especificidade do sinal com peptídeos de bloqueio ou tecido knockout.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), confirme o padrão de coloração mitocondrial usando uma co-coloração com marcador mitocondrial; as condições de permeabilização podem exigir otimização.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato permite estudos translacionais; a validação independente no sistema de amostra relevante é recomendada.
• O anticorpo também é adequado para aplicações de ELISA; o emparelhamento com outros anticorpos IDH3A pode permitir o desenvolvimento de ELISA sanduíche.

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