Anticorpo policlonal de coelho anti-IFI16 - Q16666

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da IFI16

• IFI16 (proteína 16 induzível por interferon gama, também conhecida como IFNGIP1 e PYHIN2) é um membro da família de proteínas PYHIN, caracterizada por um domínio PYRIN N-terminal e dois domínios HIN C-terminais envolvidos na ligação ao DNA.
• Funciona como um sensor de DNA de fita dupla, ligando-se preferencialmente a estruturas de DNA superenroladas e cruciformes, e desempenha um papel na regulação transcricional, podendo atuar como um repressor transcricional.
• Está envolvida na regulação da diferenciação hematopoiética e no controle da proliferação celular por meio da modulação de fatores reguladores do ciclo celular, incluindo p53/TP53 e a proteína do retinoblastoma.
• Participa da ativação transcricional mediada por TP53 ao aumentar a ligação específica de TP53 ao DNA e sua fosforilação, além de estar envolvida na ativação dependente dos níveis de energia da via ATM/AMPK/TP53 associada à regulação da autofagia.
• É um componente essencial da resposta imune inata: reconhece o dsDNA viral no citosol e no núcleo, recruta TMEM173/STING para induzir IFN-beta e restringe a replicação de herpesvírus ao inibir a expressão de genes virais e promover a formação de heterocromatina.
• Existe em isoformas que inibem especificamente o inflamassoma AIM2 ao se ligarem ao dsDNA citoplasmático e impedirem a interação AIM2-PYCARD, ao mesmo tempo que induzem fracamente o IFN-beta via STING1 (PubMed:30104205). Referências relacionadas: PMID:30104205
• Localiza-se tanto no núcleo quanto no citoplasma e é amplamente expressa, apresentando níveis mais elevados em leucócitos do sangue periférico, fibroblastos, células linfoides e tecidos como próstata, ovário e mama.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e formação de ligações isopeptídicas, refletindo sua regulação dinâmica na apoptose, autofagia e respostas inflamatórias.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 500-785, visando à região C-terminal da IFI16 que inclui os domínios HIN. Essa região é essencial para a ligação ao DNA e pode ser conservada entre as isoformas que contêm esse segmento, detectando potencialmente a IFI16 de comprimento completo, bem como determinadas isoformas.
• Para Western blot (WB), considere usar lisados de células inteiras de linhagens celulares humanas conhecidas por expressar IFI16 (por exemplo, HeLa e THP-1). Os pesos moleculares previstos são de 75–88 kDa; bandas adicionais podem representar isoformas ou formas modificadas pós-traducionalmente.
• Para citometria de fluxo (FC), recomenda-se a marcação intracelular devido à localização nuclear e citoplasmática da IFI16. Valide o anticorpo no sistema de amostra relevante e inclua controles apropriados.
• As aplicações em ELISA podem ser adequadas para detectar IFI16 em lisados celulares ou proteínas purificadas; recomenda-se otimizar as condições de revestimento e detecção.

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