Anticorpo Policlonais Anti-IFIT3 para WB, ELISA - O14879

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IFIT3

• IFIT3 (Proteína induzida por interferão com repetições tetratricopeptídicas 3), também conhecida como CIG49, ISG-60, IFI-60K, IFIT-4 ou RIG-G, é uma proteína de 56 kDa citoplasmática e mitocondrial induzida por interferão.
• Ela atua como uma proteína antiviral ao potencializar a sinalização mediada por MAVS: a IFIT3 conecta TBK1 a MAVS, promovendo a ativação de TBK1 e a fosforilação de IRF3, que então se transloca para o núcleo para induzir a transcrição de genes antivirais.
• Ela apresenta atividade antiproliferativa ao up-regular os inibidores do ciclo celular CDKN1A/p21 e CDKN1B/p27, em parte ao sequestrar COPS5 no citoplasma para impedir a degradação de p27, e ao down-regular MYC, um repressor do p21.
• A IFIT3 pode regular negativamente os efeitos apoptóticos da IFIT2.
• Sua expressão está elevada em células mononucleares do sangue periférico e monócitos de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico, e também é expressa no baço, pulmão, leucócitos, linfonodos, placenta, medula óssea e fígado fetal.
• Ela pertence à família das repetições tetratricopeptídicas (TPR) e está envolvida na imunidade inata e na defesa antiviral; a proteína está sujeita a fosforilação (em nível proteico) e foi identificada em estudos de proteômica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para gerar esse anticorpo policlonal é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 100–200 da IFIT3 de camundongo, uma região altamente conservada entre humanos, camundongos e ratos. Esse desenho racional suporta a reatividade cruzada do anticorpo entre essas espécies.
• Para western blot (WB), espera-se uma banda principal em torno de 56 kDa. Considere utilizar condições redutoras e lisados de controle positivo apropriados (por exemplo, células HeLa ou RAW 264.7 tratadas com IFN) para confirmar a especificidade.
• No ELISA, faça a titulação do anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para o seu formato de placa e antígeno específicos. Valide com uma curva padrão utilizando proteína IFIT3 recombinante, se disponível.
• Apesar de não estar listado nas aplicações validadas, esse anticorpo policlonal pode ser adequado para imunoprecipitação ou imunofluorescência, se validado no sistema experimental do usuário final, dada a localização citoplasmática e mitocondrial da proteína alvo.
• Nota: O anticorpo é policlonal e, portanto, pode apresentar variação entre lotes; recomendamos incluir controles negativos apropriados (por exemplo, lisados de knockout para IFIT3) em todos os experimentos.

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