Anticorpo policlonal de coelho anti-IFN gama para WB, ELISA - P01579

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do IFN gama

• O interferon gama (IFN gama) é um interferon do tipo II, também conhecido como interferon imune, codificado pelo gene IFNG em humanos. É secretado principalmente por linfócitos T ativados e células natural killer.
• Atua como uma citocina potente nas respostas antimicrobianas, antivirais e antitumorais, ativando células imunes efetoras e aumentando a apresentação de antígenos. Referências relacionadas: PMID:16914093 PMID:8666937
• Ativa a via JAK-STAT após a ligação ao seu receptor IFNGR1, levando à ativação de STAT1 e à transcrição de genes regulados pelo IFN gama, como IRF1. Referências relacionadas: PMID:8349687 PMID:16914093
• Aumenta a apresentação de antígenos pelo MHC de classe I ao induzir subunidades do imunoproteassoma e o ativador PA28, aumentando a quantidade e a qualidade dos peptídeos disponíveis para carregamento no MHC. Referências relacionadas: PMID:8666937 PMID:8163024 PMID:11112687
• Regula positivamente a expressão do complexo MHC de classe II ao promover moléculas-chave, como as catepsinas B, H e L. Referência relacionada: PMID:7729559
• Está envolvido na regulação das células-tronco hematopoiéticas, afetando seu desenvolvimento, quiescência e diferenciação durante a homeostase (por similaridade).
• A localização subcelular é secretada, de acordo com seu papel como citocina. A pró-proteína contém um peptídeo sinal e sofre clivagem em um par de resíduos básicos para gerar a forma madura.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de ácido piroglutâmico, conforme indicado pelas palavras-chave do UniProt.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange a sequência madura do IFN gama (aa 24-166), tendo como alvo o domínio funcional; considere esse aspecto ao projetar peptídeos bloqueadores ou ensaios de competição.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 19 kDa; garanta uma porcentagem adequada de gel e condições de transferência apropriadas para proteínas de baixo peso molecular.
• Como o IFN gama é uma citocina secretada, a preparação das amostras deve considerar sua presença em soro, plasma ou sobrenadantes de cultura celular; inclua controles adequados e inibidores de protease para evitar a degradação.
• Para ELISA, este anticorpo policlonal pode ser utilizado como anticorpo de captura ou de detecção; no entanto, a combinação com um anticorpo monoclonal em um ELISA sanduíche pode melhorar a especificidade.
• Valide o desempenho em amostras biológicas relevantes, como lisados de células T ativadas ou PBMCs estimuladas, para confirmar a reatividade e estabelecer empiricamente as diluições de trabalho ideais.

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