Anticorpo Policlonal Anti-IGF2BP3 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00425

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IGF2BP3

• A proteína de ligação a mRNA do fator de crescimento semelhante à insulina 2 (IGF2BP3), também conhecida como IMP3 ou KOC, é um membro da família VICKZ de proteínas de ligação a RNA e é codificada pelo gene IGF2BP3 (GeneID: 10643) em humanos.
• O IGF2BP3 atua como um fator de ligação a RNA que recruta transcritos-alvo para complexos de ribonucleoproteína mensageira (mRNP) citoplasmáticos, permitindo o transporte de mRNA, armazenamento transitório e proteção contra ataques de endonucleases ou degradação mediada por microRNA. Referências relacionadas: PMID:29476152
• Ele se liga preferencialmente a mRNAs modificados com N6-metiladenosina (m6A), aumentando sua estabilidade; por exemplo, estabiliza o mRNA de CD44 ligando-se ao seu 3'-UTR (promovendo adesão celular e invadopódios no câncer) e ao mRNA de MYC ligando-se à região determinante de instabilidade de codificação (CRD) de maneira dependente de m6A. Referências relacionadas: PMID:29476152
• O IGF2BP3 também se liga ao 5'-UTR de mRNAs do fator de crescimento semelhante à insulina 2 (IGF2), implicando-o na regulação do fator de crescimento.
• A proteína localiza-se no núcleo, citoplasma, corpos-P e grânulos de estresse, refletindo seus papéis dinâmicos nas decisões sobre o destino do mRNA.
• A expressão tecidual é proeminente em fígado fetal, pulmão, rim, timo, placenta e vários cânceres (por exemplo, adenocarcinoma cervical, testicular, pancreático e carcinomas de células renais), e é amplamente expressa durante o desenvolvimento fetal.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e conjugação de ubiquitina (ligação isopeptídica), que podem regular sua atividade ou estabilidade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado corresponde a uma região (aminoácidos 300–579) distal aos domínios canônicos de ligação a RNA, potencialmente minimizando a interferência com a ligação ao alvo em aplicações de IP ou IF.
• Para Western blot (WB), o peso molecular esperado é de aproximadamente 64 kDa; considere o uso de gel redutor e marcadores de peso molecular apropriados.
• Em IHC-P, a recuperação de antígeno usando recuperação de epítopo induzida por calor (HIER) em tampão citrato ou EDTA pode melhorar a detecção; valide no sistema de amostra relevante.
• Para IF/ICC, a fixação com paraformaldeído a 4% e a permeabilização com Triton X-100 a 0,1% são pontos de partida típicos; a coloração nuclear e citoplasmática deve ser avaliada.
• Na imunoprecipitação (IP), confirme a capacidade do anticorpo de precipitar complexos endógenos de IGF2BP3; otimize a stringência do tampão de lise para preservar as interações proteína-proteína.
• O desempenho do ELISA pode ser avaliado por formatos diretos ou sanduíche; como um anticorpo policlonal, pode servir tanto como reagente de captura quanto de detecção quando emparelhado com um anticorpo monoclonal adequado.
• Observe a reatividade cruzada com camundongo e rato, indicando epítopos conservados; sempre verifique a reatividade na espécie de interesse com controles adequados.

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