Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-IGHA1 para WB, FC, ELISA - P01876

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IGHA1

• O IGHA1 codifica a região constante da cadeia pesada alfa-1 da imunoglobulina, que se combina com cadeias leves para formar anticorpos IgA1. Nos linfócitos B, o IGHA1 ligado à membrana atua como recetor de antigénio; após a ligação do antigénio, desencadeia a expansão clonal e diferenciação em plasmócitos secretores de anticorpos. A IgA1 secretada é o anticorpo dominante nas secreções mucosas, mediando a fase efetora da imunidade humoral para eliminar antigénios ligados. O domínio variável responsável pelo reconhecimento do antigénio é gerado por rearranjo V-(D)-J e sofre hipermutação somática, permitindo a maturação de afinidade.
  Referências relacionadas:
  PMID:20176268, PMID:22158414, PMID:17576170, PMID:2241915

• A nível subcelular, o IGHA1 localiza-se na membrana plasmática das células B e é secretado como uma imunoglobulina solúvel para os espaços extracelulares, particularmente em superfícies mucosas.

• A proteína contém domínios de imunoglobulina estabilizados por ligações dissulfeto, é N-glicosilada e pode sofrer splicing alternativo e rearranjos cromossómicos.

• De acordo com a UniProt, a região constante madura do IGHA1 tem um peso molecular calculado de aproximadamente 42,8 kDa (UniProt: 42849 Da).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O peptídeo imunogénio abrange os aminoácidos 122–353, cobrindo os domínios CH2 e CH3 do IGHA1 humano (P01876); isto pode conferir especificidade para o isótipo IgA1 em relação à IgA2. Considere verificar a especificidade da subclasse no seu sistema experimental.
• Para Western blot (WB) em condições redutoras, pode ser detetada uma banda predominante em torno de 38 kDa, correspondente à região constante da cadeia pesada IGHA1; no entanto, o peso molecular aparente pode variar devido à glicosilação e associação com cadeias leves em condições não redutoras.
• Em citometria de fluxo (FC), pode ser necessária a coloração intracelular de linfócitos B permeabilizados ou plasmócitos secretores de IgA para uma deteção ótima da forma citoplasmática; a coloração de superfície da IgA de membrana também pode ser viável.
• Como um anticorpo policlonal de coelho, é adequado para aplicações ELISA; a reatividade cruzada com outras espécies ou subclasses de imunoglobulinas deve ser validada de forma independente.

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