Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-IHH para WB e ELISA - Q14623

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IHH

• IHH (proteína Indian hedgehog) é um membro da família hedgehog, codificada pelo gene IHH. O precursor de comprimento total sofre clivagem autoproteolítica e modificação por colesterol para gerar o morfogênio ativo N-produto.
• O N-produto da IHH ativa a via de sinalização smoothened ao se ligar aos receptores patched (PTCH1/2), aliviando a inibição do SMO, o que é essencial para o desenvolvimento ósseo e cartilaginoso.
• IHH regula positivamente a expressão de PTHLH para prevenir a hipertrofia dos condrócitos durante a formação óssea endocondral e, independentemente, promove a proliferação dos condrócitos.
• IHH desempenha um papel na sinalização parácrina hedgehog (PMID:24342078) e, quando associada a partículas de VLDL, atua como um morfogênio circulante para manter a integridade das células endoteliais (PMID:20839884). Referências relacionadas: PMID:24342078 PMID:20839884
• Além do desenvolvimento esquelético, a IHH está envolvida no desenvolvimento do epitélio pigmentar da retina, fotorreceptores e tecidos perioculares.
• Subcelularmente, a proteína reside nas membranas do retículo endoplasmático e do aparelho de Golgi; o N-produto secretado pode se associar à membrana celular.
• A expressão tecidual é observada no pulmão embrionário e, no adulto, no rim e no fígado.
• Modificações pós-traducionais importantes incluem clivagem autocatalítica, ligação de colesterol e palmitoilação; a proteína é classificada como glicoproteína e lipoproteína.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 202–411 do IHH humano, cobrindo uma região distal ao sítio de clivagem autocatalítica. A proteína de comprimento total tem um peso molecular previsto de 45 kDa, mas considere que o IHH endógeno pode ser processado, resultando em bandas adicionais no WB.
• Para Western blot, valide a especificidade do anticorpo usando controles positivos apropriados (por exemplo, tecidos ou células conhecidos por expressar IHH) e considere usar um controle de carga. Otimize as condições de bloqueio e detecção empiricamente.
• Este anticorpo policlonal reage com IHH humano, de camundongo e de rato, tornando-o adequado para estudos entre espécies. No entanto, confirme a reatividade na espécie-alvo se não tiver sido previamente validada.
• Para ELISA, a titulação do anticorpo e as concentrações ótimas de antígeno de revestimento devem ser determinadas experimentalmente.
• Como com qualquer reagente policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; considere reservar um padrão de calibração para resultados consistentes.

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