Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-Ikaros para WB - Q13422

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Ikaros

• A proteína de ligação ao DNA Ikaros (IKZF1) é um fator de transcrição de dedo de zinco pertencente à família Ikaros, codificado pelo gene IKZF1 (também conhecido como LYF1, ZNFN1A1). É um regulador chave da diferenciação de células hematopoéticas (PubMed:17934067). Referências relacionadas: PMID:17934067
• O Ikaros se liga ao DNA de satélite gama, contribuindo para a regulação da estrutura da cromatina e da expressão gênica (PubMed:17135265, PubMed:19141594). Referências relacionadas: PMID:17135265 | PMID:19141594
• Desempenha um papel fundamental no desenvolvimento de linfócitos, incluindo células B e T, ao se ligar e ativar o amplificador do gene CD3-delta e reprimir o gene TdT durante a diferenciação de timócitos.
• Por meio da associação com complexos dependentes e independentes de HDAC, o Ikaros regula a transcrição, e direciona os complexos de remodelação da cromatina NuRD e BAF (SWI/SNF) para o lócus da beta-globina em eritrócitos adultos por meio do complexo PYR.
• O Ikaros aumenta a apoptose normal em células eritroides adultas e confere competência temporal precoce às células progenitoras retiniana (RPCs) (Por similaridade).
• A função do Ikaros é específica da isoforma e é modulada por isoformas inativas dominantes-negativas (PubMed:17135265, PubMed:17934067). Referências relacionadas: PMID:17135265 | PMID:17934067
• A localização subcelular é principalmente nuclear, mas também pode ser encontrado no citoplasma. A expressão tecidual é abundante no timo, baço, leucócitos do sangue periférico e linfonodos, com níveis mais baixos na medula óssea e no intestino delgado.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e formação de ligação isopeptídica; a proteína contém múltiplos dedos de zinco do tipo C2H2 essenciais para a ligação ao DNA.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-270) do Ikaros humano, englobando domínios funcionais chave; esse design pode permitir o reconhecimento de múltiplas isoformas que compartilham essa sequência. Valide a especificidade no seu sistema experimental usando controles adequados, como amostras com knockdown ou knockout de Ikaros.
• Para Western blot (WB), considere usar extratos nucleares de tecidos linfoides ou linhas celulares (por exemplo, timo, baço, Jurkat), devido à expressão abundante de Ikaros nessas amostras. É esperada uma banda em torno de 58 kDa para a proteína de comprimento total.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), o Ikaros exibe marcação predominantemente nuclear; garanta uma permeabilização adequada e considere a marcação simultânea com um marcador nuclear.
• Para imunoprecipitação da cromatina (ChIP), verifique se o anticorpo pode imunoprecipitar eficientemente os loci genômicos ligados ao Ikaros. Otimize as condições de ligação cruzada e sonicação para o seu tipo de celular.
• Esse anticorpo apresenta reatividade cruzada com Ikaros de camundongo e rato; no entanto, recomenda-se o alinhamento de sequência do peptídeo imunógeno entre as espécies para confirmar a adequação para esses modelos.

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