Anticorpo monoclonal de coelho anti-IKK beta para WB, IP, IF/ICC, ELISA - O14920

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da IKK beta

• Identidade da proteína: A IKK beta (IKBKB) é uma proteína quinase de serina/treonina, também conhecida como IKK-2, NFKBIKB ou IKK-beta, e constitui uma subunidade catalítica central do complexo da quinase de IκB (IKK).
• Sinalização de NF-κB: Desempenha um papel essencial na via canônica de NF-κB, ativada por citocinas pró-inflamatórias, patógenos ou estresse celular, levando à fosforilação e subsequente degradação dependente de ubiquitina dos inibidores de IκB e à translocação nuclear de NF-κB (PubMed:20434986, PubMed:20797629, PubMed:21138416). Referências relacionadas: PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416
• Diversidade de substratos: Além de IκB, a IKK beta fosforila NEMO/IKBKG, as subunidades de NF-κB RELA e NFKB1 e as quinases relacionadas à IKK TBK1/IKBKE, fornecendo um mecanismo de feedback negativo que previne a inflamação excessiva (PubMed:11297557, PubMed:20410276). Referências relacionadas: PMID:11297557, PMID:20410276
• Funções regulatórias adicionais: A IKK beta fosforila FOXO3 para inibir a apoptose, modifica RIPK1 para suprimir a morte celular induzida por TNF, ativa IRF5 para a indução de interferon e fosforila STAT1 para promover a expressão de genes inflamatórios (PubMed:15084260, PubMed:25326418, PubMed:32209697, PubMed:38621137). Referências relacionadas: PMID:15084260, PMID:25326418, PMID:32209697, PMID:38621137
• Localização subcelular: Encontrada no citoplasma, no núcleo e em jangadas de membrana, em consonância com seu papel dinâmico na transdução de sinais.
• Expressão tecidual: Altamente expressa no coração, placenta, músculo esquelético, rim, pâncreas, baço, timo, próstata, testículos e sangue periférico.
• Relevância para doenças: Mutações em IKBKB estão associadas à imunodeficiência combinada grave (SCID) e a outras doenças imunológicas, ressaltando seu papel crítico na função imune.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 261-411, tendo como alvo uma região central da IKK beta humana. Esse desenho pode reconhecer múltiplas isoformas ou produtos de clivagem, conforme sugerido pela ampla faixa de peso molecular observada (29–87 kDa).
• Para Western blot, valide o anticorpo em linhagens celulares humanas relevantes (por exemplo, HeLa e Jurkat) e utilize controles negativos apropriados. Considere o uso de inibidores de protease durante a lise para minimizar a degradação.
• Na imunoprecipitação (IP), o anticorpo pode precipitar o complexo IKK; confirme a coprecipitação de NEMO/IKBKG caso esteja estudando a montagem do complexo.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), espere uma marcação citosólica e nuclear; a localização em jangadas de membrana pode exigir protocolos especializados de fixação/permeabilização.
• As aplicações em ELISA devem utilizar uma curva padrão validada com proteína IKK beta recombinante para quantificação.

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