Anticorpo monoclonal de coelho anti-IKKα para WB, ELISA - O15111

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da IKKα

• A subunidade alfa da quinase do inibidor do fator nuclear kappa-B (IKKα), também conhecida como CHUK, IKK1, IKKA ou TCF-16, é uma quinase de serina/treonina essencial para a sinalização de NF-kappa-B ativada por citocinas inflamatórias, produtos bacterianos/virais ou estresse celular. Referências relacionadas: PMID:18626576 PMID:9244310 PMID:9252186

• Na via canônica de NF-κB, a IKKα fosforila os inibidores de NF-κB (IκBs) em resíduos de serina, desencadeando sua degradação dependente de ubiquitina e liberando o NF-κB para translocar-se ao núcleo e ativar a transcrição de genes imunes e de sobrevivência. Referências relacionadas: PMID:18626576 PMID:9244310 PMID:9252186

• Como parte da via não canônica de NF-κB, o homodímero CHUK/IKKα fosforila NFKB2/p100, promovendo seu processamento em p52 e a formação de complexos RelB-p52 transcricionalmente ativos, regulando a sobrevivência das células B e a organogênese linfoide. Referências relacionadas: PMID:20501937

• A IKKα regula negativamente a sinalização de NF-κB ao fosforilar TAXBP1 para montar o complexo de edição de ubiquitina A20 e ao desestabilizar MAP3K14/NIK na via não canônica, fornecendo um controle crítico por retroalimentação. Referências relacionadas: PMID:21765415

• No núcleo, a IKKα fosforila diretamente a histona H3 em Ser-10 e a acetiltransferase CREBBP, aumentando a acessibilidade da cromatina e a atividade transcricional nos promotores responsivos a NF-κB. Referências relacionadas: PMID:12789342 PMID:17434128

• Entre os substratos adicionais estão FOXO3 (fator de transcrição pró-apoptótico), RIPK1 (regulação da necroptose) e AMBRA1 (mitofagia), destacando suas diversas funções celulares. Referências relacionadas: PMID:15084260 PMID:30217973

• A IKKα é amplamente expressa e localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo, onde sofre acetilação e fosforilação regulatórias.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético derivado de CHUK; portanto, este anticorpo monoclonal pode reconhecer a IKKα endógena em amostras humanas, de camundongo e de rato. Considere validá-lo em suas linhagens celulares e tecidos específicos.
• Para Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 85 kDa em condições redutoras. Otimize a diluição do anticorpo e o carregamento da amostra com base nos níveis de expressão de IKKα em seu sistema.
• Para ELISA, associe-o a um sistema adequado de captura/detecção após determinar a concentração ideal de revestimento e as condições de incubação.
• Como a IKKα está envolvida em diversos complexos de sinalização, considere realizar ensaios de coimunoprecipitação ou pull-down com cuidado, pois a acessibilidade do epítopo pode variar.

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