Anticorpo policlonal de coelho Anti-IKKε (IKBKE) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14164

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IKKε (IKBKE)

• IKKε (IKBKE) é uma serina/treonina quinase que medeia respostas inflamatórias e antivirais ao ativar as vias de sinalização do interferon tipo I, NF-κB e STAT.
• Após infecção viral, o IKKε interage com sensores de RNA (ex: RIG-I) e adaptadores (ex: MAVS, TANK) para fosforilar IRF3 e IRF7, induzindo sua dimerização e translocação nuclear para promover a expressão de genes antivirais.
• O IKKε também fosforila STAT1 na Ser-708, promovendo a formação de complexos ISGF3 (STAT1-STAT2-IRF9) e a indução de genes estimulados por interferon (ISGs) com atividade antiviral direta.
• Além da imunidade, o IKKε contribui para a homeostase energética ao sustentar a inflamação crônica associada à obesidade, que impacta negativamente a sensibilidade à insulina, e fosforila AKT1.
• Subcelularmente, o IKKε se localiza no citoplasma, núcleo e corpos nucleares PML, refletindo seus papéis dinâmicos na transdução de sinal.
• A proteína é altamente expressa em tecidos linfoides (baço, timo, leucócitos do sangue periférico) e no pâncreas/placenta, com níveis mais baixos em pulmão, rim, próstata, ovário e cólon.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e poliubiquitinação, que são críticas para sua ativação em resposta a TNFα e IL-1.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, aumentando a diversidade funcional do IKKε.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• É esperado que o anticorpo detecte uma banda de ~80 kDa por Western blot; verifique o tamanho da banda usando lisados de controle positivo (ex: Jurkat, THP-1 ou tecido de baço).
• Para IHC-P e IF/ICC, otimize as condições de fixação e recuperação de antígeno; o tampão citrato (pH 6,0) com recuperação epitópica induzida por calor geralmente é eficaz.
• Ao estudar a ativação do IKKε, considere combinar este anticorpo com sondas fosfo-específicas ou dependentes de ativação para avaliar o estado de fosforilação.
• Valide a reação cruzada em tecidos de camundongo e rato usando controles específicos de espécie apropriados e observe o potencial background dependente da espécie.
• Para aplicações de ELISA, este anticorpo policlonal pode ser usado como reagente de captura ou detecção; faça a titulação para determinar a concentração de trabalho ideal.

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