Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-IKKγ para WB, IP, ELISA - Q9Y6K9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IKKγ

• O IKKγ, também conhecido como NEMO ou IKBKG, é a subunidade reguladora do complexo canônico da quinase IκB (IKK), essencial para a sinalização de NF-κB. Atua como um andaime coordenando as subunidades quinases IKKα e IKKβ.
• A função central do IKKγ é facilitar a fosforilação e a subsequente degradação dependente de ubiquitina dos inibidores de NF-κB (IκBs), liberando assim o NF-κB para translocação nuclear e ativação de genes alvo (PubMed:14695475, PubMed:20724660, PubMed:21518757). Referências relacionadas: PMID:14695475 PMID:20724660 PMID:21518757
• Reconhece e liga-se especificamente a cadeias de poliubiquitina, exibindo alta afinidade pela ubiquitina linear (ligação M1) e ligada a Lys-63. Essa capacidade de detecção de ubiquitina é crítica para a ativação do IKK a jusante de TNF, IL-1 e receptores Toll-like (PubMed:16547522, PubMed:18287044, PubMed:19033441). Referências relacionadas: PMID:16547522 PMID:18287044 PMID:19033441
• O IKKγ transita entre o citoplasma e o núcleo, contribuindo para respostas a danos no DNA e regulação transcricional.
• A proteína está envolvida na imunidade inata antiviral: é essencial para a ativação de IRF3 após infecção viral (PubMed:19854139) e media as vias TLR3/IFIH1 via poliubiquitinação ligada a Lys-27 (PubMed:20724660). Referências relacionadas: PMID:19854139 PMID:20724660
• O IKKγ é amplamente expresso em tecidos humanos, incluindo coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, músculo esquelético, rim e pâncreas.
• Mutações no gene IKBKG estão ligadas a vários distúrbios genéticos, como incontinentia pigmenti, displasia ectodérmica anidrótica com imunodeficiência e osteopetrose.
• A proteína contém um domínio de enrolamento em hélice (coiled-coil) e um dedo de zinco C-terminal que medeia interações proteína-proteína e ligação de ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína recombinante que cobre quase todo o comprimento do IKKγ humano (aa 1-419). Como um anticorpo policlonal de coelho, ele pode reconhecer múltiplos epítopos e detectar várias isoformas ou formas pós-traducionalmente modificadas do alvo.
• Para Western blot, múltiplas bandas podem ser observadas (pesos moleculares previstos de 37, 48 e 56 kDa), possivelmente representando variantes de splicing ou espécies proteicas modificadas. Valide a detecção e a intensidade relativa das bandas usando lisados de controle positivo e negativo apropriados de linhagens de células humanas ou de camundongo.
• Na imunoprecipitação, as etapas de pré-limpeza e as condições apropriadas do tampão de lise devem ser otimizadas, pois o IKKγ existe em um complexo multiproteico grande.
• Para aplicações de ELISA, considere usar um par de anticorpos correspondente para captura e detecção, e verifique a sensibilidade com IKKγ recombinante ou amostras positivas conhecidas.
• Devido à alta reatividade cruzada com camundongo, este anticorpo é adequado para estudos em modelos de camundongo, mas valide no tecido ou tipo celular específico de interesse.

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