Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-IKKβ para WB, ELISA - O14920

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IKKβ

• O IKKβ, também conhecido como IKK2 ou IKBKB, é uma serina/treonina quinase e a subunidade catalítica do complexo quinase IκB (IKK), essencial para a sinalização canônica de NF-kappa-B. Referências relacionadas: PMID:9346484
• Fosforila inibidores de NF-kappa-B (IκBs) em resíduos de serina críticos, desencadeando sua ubiquitinação e degradação proteassomal, liberando assim o NF-kappa-B para se translocar para o núcleo e ativar a transcrição de genes imunes, proliferativos e antiapoptóticos. Referências relacionadas: PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416
• Além dos IκBs, o IKKβ fosforila múltiplos componentes de sinalização, incluindo NEMO, RELA, NFKB1, TBK1 e IKBKE, bem como substratos como FOXO3, NAA10, NCOA3, BCL10, IRS1, RIPK1 e IRF5, ajustando finamente as respostas imunes e vias de morte celular. Referências relacionadas: PMID:11297557, PMID:14673179, PMID:20410276, PMID:15084260, PMID:17213322, PMID:19716809, PMID:25326418
• Após a endocitose de TLR4 induzida por LPS, o IKKβ fosforila STAT1 em Thr-749, promovendo a expressão de ARID5A e estabilização de IL-6, bem como a transcrição de IL-12B, ligando a inflamação inata à imunidade adaptativa. Referências relacionadas: PMID:38621137, PMID:32209697
• O IKKβ está localizado no citoplasma, núcleo e balsas de membrana, consistente com seus papéis dinâmicos na transdução de sinais.
• É altamente expresso no coração, placenta, músculo esquelético, rim, pâncreas, baço, timo, próstata, testículo e sangue periférico, refletindo suas amplas funções regulatórias.
• Palavras-chave destacam seu envolvimento em fosforilação, acetilação, ubiquitinação, interações hospedeiro-vírus e variantes de doenças, com um peso molecular previsto de ~87 kDa (embora a detecção experimental varie de 29–87 kDa devido a isoformas/clivagem).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, espera-se uma banda correspondente ao IKKβ de comprimento total próximo a 87 kDa; no entanto, múltiplas bandas entre 29–87 kDa podem ser observadas devido ao splicing alternativo, degradação ou modificações pós-traducionais. Valide usando controles positivos (por exemplo, células HeLa ou Jurkat estimuladas com TNFα) para confirmar a especificidade.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; considere o emparelhamento com um anticorpo monoclonal validado para IKKβ para o desenvolvimento de ELISA sanduíche. Experimentos de titulação são recomendados para determinar as concentrações de trabalho ideais.
• Como o imunógeno abrange os aminoácidos 400–669, o anticorpo visa a metade C-terminal da proteína, o que pode não reconhecer truncações N-terminais ou certos mutantes associados a doenças; a reatividade cruzada com membros próximos da família (IKKα) deve ser avaliada experimentalmente usando proteínas recombinantes ou lisados de knockout.

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