Anticorpo Monoclonal Anti-IL-31 para WB, IF/ICC, ELISA - Q6EBC2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IL-31

• A Interleucina-31 (IL-31) é uma citocina secretada que sinaliza através de um complexo de receptor heterodimérico composto pelo receptor de oncostatina M (OSMR) e pelo receptor A de IL-31 (IL31RA) (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Referências relacionadas: PMID:15184896 PMID:15627637
• Após a ligação do ligante, IL31RA heterodimeriza com OSMR, levando à ativação das quinases Janus JAK1 e JAK2, que fosforilam resíduos de tirosina nas subunidades do receptor, criando locais de ancoragem para os fatores de transcrição STAT1, STAT3 e STAT5B (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Referências relacionadas: PMID:15184896 PMID:15627637
• A sinalização de IL-31 também ativa a via MAPK (ERK1/2) através do recrutamento da proteína adaptadora SHC1 (PubMed:15627637). Referências relacionadas: PMID:15627637
• Desempenha um papel crítico na imunidade da pele, com implicações em condições inflamatórias da pele (PubMed:15184896). Referências relacionadas: PMID:15184896
• Melhora a sobrevivência de células progenitoras mieloides in vitro e induz a expressão de resistina-like alfa (RETNLA) e proteína amiloide S sérica em macrófagos (Por similaridade).
• A localização subcelular é principalmente secretada, consistente com sua função de citocina.
• Detectada em níveis baixos em vários tecidos, incluindo testículo, medula óssea, músculo esquelético, rim, cólon, timo, intestino delgado e traqueia.
• Contém um peptídeo sinal e é N-glicosilada; a proteína madura prevista tem um peso molecular de aproximadamente 18,2 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio compreende os aminoácidos 24-164 do IL-31 humano, correspondendo à proteína secretada madura. Esta proteína recombinante foi usada como imunogênio, sugerindo que o anticorpo detecta a forma nativa processada; considere o uso de condições desnaturantes para Western blot para garantir o desenrolamento completo, mas verifique o desempenho em condições nativas para IF/ICC.
• Para Western blot, espera-se uma proteína de aproximadamente 18 kDa. Use um gel SDS-PAGE de 12-15% para resolução ideal de proteínas de baixo peso molecular e transferência para membrana de PVDF ou nitrocelulose com tamanho de poro de 0,2 µm.
• Em imunofluorescência/immunocitoquímica, uma vez que o IL-31 é secretado, inclua um inibidor de transporte de proteínas (por exemplo, brefeldina A) no meio de cultura antes da fixação para prender a proteína intracelular. Valide o padrão de coloração com controles positivos e negativos apropriados.
• Para ELISA, o anticorpo monoclonal pode ser avaliado como reagente de captura ou detecção em formato sanduíche, emparelhado com outro clone ou um anticorpo policlonal. Teste as concentrações de revestimento ideais e as condições de tampão empiricamente.
• Embora validado para humano, a reatividade cruzada com outras espécies não foi relatada; teste a reatividade em seu sistema modelo se usar amostras não humanas.

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