mAb de coelho anti-IL11RA para WB - Q14626

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de IL11RA

• A subunidade alfa do receptor da interleucina-11 (IL11RA), também conhecida como CRSDA, é um receptor transmembrana que também existe na forma solúvel (sIL11RA), gerada por splicing alternativo.

• IL11RA liga-se especificamente à interleucina-11 (IL11) e, juntamente com o transdutor de sinal comum IL6ST/gp130, medeia vias de sinalização que controlam a proliferação e a diferenciação de progenitores esqueléticos e de outras células mesenquimais.

• A forma solúvel sIL11RA atua como agonista da atividade de IL11, permitindo a transsinalização de IL11 em células que não possuem IL11RA ligado à membrana, por meio da formação de um complexo IL11:sIL11RA que interage com IL6ST/gp130 na superfície celular. Referências relacionadas: PMID:26876177 PMID:30279168

• IL11RA é essencial para o desenvolvimento normal dos ossos craniofaciais e dos dentes; restringe a fusão das suturas e regula o número de dentes.

• O receptor é expresso em várias linhagens celulares, incluindo leucemia mielógena K-562, leucemia megacariocítica M-07e, eritroleucemia TF-1 e osteossarcoma MG-63 e SaOS-2. A expressão também é detectada em células epiteliais prostáticas normais e malignas, com níveis elevados no carcinoma de próstata. Referências relacionadas: PMID:7670098

• Subcelularmente, IL11RA localiza-se na membrana plasmática e também é secretado na forma solúvel.

• As principais características estruturais incluem um domínio semelhante à imunoglobulina, ligações dissulfeto e sítios de N-glicosilação, classificando-o como um receptor glicoproteico.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 323–422) está localizado na região extracelular de IL11RA humano; a conservação da sequência entre as espécies pode explicar a reatividade cruzada observada com camundongo e rato.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 45 kDa; no entanto, a glicosilação pode resultar em uma massa aparente maior. Considere o uso de um controle de carregamento adequado e valide a especificidade da banda utilizando amostras com knockdown ou knockout, quando disponíveis.
• Métodos padrão de recuperação antigênica (por exemplo, tampão de citrato induzido por calor) são recomendados para IHC-P. Inclua controles de isotipo e verifique os padrões de coloração em relação aos dados conhecidos de expressão tecidual.
• Para IF/ICC, pode ser necessária uma permeabilização suave para acessar o epítopo intracelular. A co-coloração com marcadores de organelas pode ajudar a confirmar a localização na membrana.
• Valide todas as aplicações no sistema de amostra relevante e sob condições otimizadas; recomenda-se a titulação do anticorpo para cada novo protocolo experimental.

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