Anticorpo Policlonal Anti-IL12A para WB, ELISA - P29459

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IL12A

• O IL12A (subunidade alfa da interleucina-12, também conhecida como p35, CLMF, NFSK, NKSF1) é uma subunidade de citocina que forma a interleucina-12 (IL-12) bioativa ao heterodimerizar com IL12B (p40) e a interleucina-35 (IL-35) ao associar-se com EBI3/IL27B. Referências relacionadas: PMID:8605935, PMID:8943050
• A IL-12 é predominantemente secretada por células apresentadoras de antígenos (células B, células dendríticas, macrófagos, granulócitos) e regula criticamente as respostas de células T e células natural killer (NK), induz a produção de interferão-gama (IFN-γ) e promove a diferenciação de células T auxiliares 1 (Th1), servindo de ponte entre a imunidade inata e adaptativa. Referências relacionadas: PMID:1673147, PMID:1674604, PMID:8605935
• O receptor de IL-12 é composto pelas subunidades IL12R1 e IL12R2; a ligação do ligante desencadeia a fosforilação de tirosina e ativação das quinases da família JAK TYK2 e JAK2, que então fosforilam o STAT4, levando à sua translocação nuclear e regulação de genes responsivos. Referências relacionadas: PMID:8943050, PMID:7528775, PMID:7638186
• Como parte da IL-35, o IL12A medeia funções imunossupressoras essenciais para a manutenção da homeostase imune hepática, sinalizando através de receptores não convencionais compostos por heterodímeros ou homodímeros de IL12RB2 e gp130/IL6ST, e exigindo exclusivamente heterodímeros STAT1–STAT4 para sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:22306691
• O IL12A é secretado e sofre modificações co e pós-traducionais, incluindo glicosilação e formação de ligações dissulfeto, que são importantes para o dobramento e estabilidade adequados do heterodímero IL-12.
• A proteína é altamente conservada entre humanos, camundongos e ratos, tornando-a um alvo adequado para estudos entre espécies.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonal de coelho foi gerado contra um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 50–150 do IL12A humano (NP_000873.2). Espera-se que reconheça tanto a subunidade monomérica IL12A quanto, em condições não redutoras, possivelmente o heterodímero IL-12 p70.
• Para Western blotting, espera-se uma banda correspondente à proteína IL12A de 25 kDa em lisados de tecidos ou linhagens celulares humanas, de camundongo e de rato (por exemplo, células dendríticas ativadas, macrófagos). Otimize a preparação da amostra para reter a forma secretada; inclua controles apropriados.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção de IL-12 nativa ou recombinante, mas recomenda-se titulação cuidadosa e pareamento com um anticorpo de detecção compatível.
• Devido à sua natureza policlonal, a consistência entre lotes deve ser validada no sistema experimental relevante antes de estudos em grande escala.

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