Anticorpo policlonal anti-IL1RA para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P18510

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da IL1RA

• A IL1RA (antagonista do receptor da interleucina-1, também conhecida como IL1RN, IL1F3, IRAP) é membro da família de citocinas da interleucina-1 e atua como inibidor competitivo da sinalização de IL1A e IL1B.
• Ela se liga ao receptor de IL1 sem induzir uma resposta celular, bloqueando assim as ações pró-inflamatórias da IL1 e protegendo contra a desregulação imune e a inflamação sistêmica desencadeadas por patógenos e outros agentes estimuladores da imunidade inata.
• O gene IL1RN sofre splicing alternativo, produzindo isoformas secretadas e intracelulares; a forma intracelular (icIL-1RA) é predominantemente expressa em células epiteliais.
• A localização subcelular inclui secreção e distribuição citoplasmática, em conformidade com seu papel como antagonista extracelular de citocinas e suas potenciais funções reguladoras intracelulares.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação e a presença de pontes dissulfeto, que podem influenciar a estabilidade e a atividade da proteína.
• A proteína madura tem peso molecular de aproximadamente 20 kDa (20.055 Da de acordo com o UniProt), o que corresponde à banda de 20 kDa detectada nas aplicações.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado para este anticorpo corresponde aos aminoácidos 24–177 da IL1RA humana, abrangendo a forma secretada madura; espera-se que reconheça tanto as isoformas secretadas quanto as intracelulares.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda de aproximadamente 20 kDa; no entanto, a glicosilação pode causar uma ligeira alteração na migração. Considere a realização de experimentos de desglicosilação para confirmar a especificidade.
• Ao utilizar o anticorpo para imunofluorescência (IF/ICC ou IF-P), verifique as condições de fixação e permeabilização, pois a IL1RA pode ser secretada ou intracelular.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com camundongo e rato, mas recomenda-se a validação nessas espécies por meio de testes com lisados de tecidos ou células relevantes, juntamente com controles apropriados.
• Para ELISA, avalie a combinação com um anticorpo de detecção e otimize as condições de revestimento para alcançar a sensibilidade desejada.

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