Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-IL33 para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - O95760

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Fundo Biológico: Função e Localização da Interleucina-33

• A interleucina-33 (IL-33), também conhecida como IL-1F11 e NF-HEV, é uma proteína de dupla função codificada pelo gene IL33 (C9orf26, IL1F11, NFHEV). Existe tanto como citocina secretada quanto como fator nuclear, com splicing alternativo gerando múltiplas isoformas.
• Como citocina, a IL-33 liga-se ao receptor IL1RL1/ST2, ativando as vias NF-kappa-B e MAPK. Promove a maturação de células Th2 e a secreção de citocinas do tipo 2, e ativa mastócitos, basófilos, eosinófilos e células natural killer. Referências relacionadas: PMID:16286016 PMID:19841166 PMID:17853410 PMID:18836528
• A IL-33 potencia a polarização alternativa de macrófagos e atua como quimioatraente para células Th2, funcionando como um 'alarmina' libertado após lesão tecidual para amplificar respostas imunes. Referências relacionadas: PMID:19841166 PMID:17853410 PMID:18836528
• A forma nuclear não clivada da IL-33 é altamente expressa em células endoteliais quiescentes, onde atua como um repressor transcricional associado à cromatina ao sequestrar NF-kappaB/RELA, reduzindo a expressão de genes pró-inflamatórios. Esta forma é rapidamente perdida após ativação angiogénica ou pró-inflamatória. Referências relacionadas: PMID:21734074 PMID:18787100
• A IL-33 induz uma reconfiguração mitocondrial rápida dependente de UCP2 em macrófagos, atenuando espécies reativas de oxigénio e preservando a integridade do ciclo de Krebs para a produção persistente de itaconato, o que suporta a diferenciação de macrófagos alternativamente ativados que resolvem a inflamação (por similaridade).
• A localização subcelular varia entre a forma nuclear (núcleo, cromossoma) e a forma secretada (citoplasma, vesículas citoplasmáticas, secreção), refletindo a sua dupla funcionalidade.
• Especificidade tecidual: Expressa a níveis elevados em vénulas endoteliais altas de amígdalas, placas de Peyer e gânglios linfáticos mesentéricos; quase indetetável na placenta.
• Palavras-chave: estrutura 3D, splicing alternativo, cromossoma, citocina, citoplasma, vesícula citoplasmática, sequenciação direta de proteínas, núcleo, identificação proteómica, proteoma de referência, secretada, transcrição.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 109-270 da IL33 humana (NP_001300974.1), que cobre o domínio da citocina madura. Para WB, considere usar controlos positivos como células endoteliais estimuladas ou IL-33 recombinante, e note que as formas de comprimento total e clivadas podem ambas ser detetadas a massas em torno de 31 kDa ou inferiores.
• Para IF/ICC e IHC-P, valide os padrões de coloração nuclear e citoplasmática em secções de tecido relevantes ou linhas celulares que expressam IL-33; realize controlos apropriados para confirmar a especificidade.
• Aplicações de ELISA podem ser desenvolvidas usando este anticorpo como reagente de captura ou deteção; titule tanto o anticorpo quanto o antigénio para otimizar a relação sinal-ruído.
• Dadas as funções dual nuclear e secretada, selecione protocolos de preparação de amostras que preservem ambos os compartimentos se estiver a investigar a expressão total de IL-33.

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