Anticorpo policlonal de coelho anti-IL7 para WB, ELISA - P13232

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da IL-7

• A interleucina-7 (IL-7) é uma citocina hematopoiética essencial para o desenvolvimento, a expansão e a sobrevivência de células T e B naïve e de memória, mantendo assim a homeostase linfoide. Referências relacionadas: PMID:25870237, PMID:7527823
• A IL-7 sinaliza por meio de um receptor heterodimérico composto por IL7RA e CSF2RG, levando à ativação das quinases JAK1 ou JAK3. Referências relacionadas: PMID:8128231
• A sinalização a jusante inclui as vias PI3K/Akt/mTOR e JAK-STAT5, que promovem a proliferação, a sobrevivência e a diferenciação celular. Referências relacionadas: PMID:18523275, PMID:20974963
• A IL-7 é uma glicoproteína secretada com peso molecular previsto de aproximadamente 20 kDa, apresentando pontes dissulfeto e glicosilação importantes para sua estabilidade e função.
• O gene IL7 humano gera várias isoformas por meio de splicing alternativo, e variantes genéticas estão associadas a imunodeficiências e condições autoimunes.
• As palavras-chave relacionadas à IL-7 incluem: estrutura 3D, splicing alternativo, citocina, variante associada a doença, ponte dissulfeto, glicoproteína, fator de crescimento, secretada, sinal.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 26–177 da IL-7 humana, o que provavelmente gera anticorpos capazes de reconhecer múltiplos epítopos. Devido à natureza policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada em ensaios críticos.
• Para Western blot (WB), espere uma banda próxima de 20 kDa em condições redutoras. Utilize lisados de tecidos ou células que expressem IL-7, como células T ativadas ou estroma tímico. Valide a especificidade do anticorpo utilizando um peptídeo bloqueador ou IL-7 recombinante, se disponível.
• Em aplicações de ELISA, considere utilizar formatos direto ou sanduíche com IL-7 humana recombinante como padrão. A reatividade cruzada do anticorpo com a IL-7 de camundongo e rato permite estudos comparativos, mas os ensaios quantitativos devem ser validados com padrões correspondentes à espécie.
• Como a IL-7 é um fator secretado, os sobrenadantes de culturas celulares ou amostras de soro podem conter níveis endógenos baixos; pode ser necessário realizar enriquecimento ou estimulação, por exemplo, com PMA/ionomicina para células T, para sua detecção.
• Inclua sempre controles positivos e negativos, como lisados de células que superexpressam IL-7 ou modelos knockout para IL-7, para confirmar a identidade da banda.

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