Anticorpo Monoclonal Anti-iNOS para WB, IF/ICC, ELISA - P35228

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da iNOS

• Codificada pelo gene NOS2 (também conhecido como iNOS, NOS2A, HEP-NOS), esta óxido nítrico sintase induzível é uma enzima essencial da família NOS, expressa em vários tecidos, incluindo fígado, retina, ossos e epitélio das vias aéreas.
• Produz óxido nítrico (NO), uma molécula mensageira versátil com funções que vão desde a vasodilatação até a defesa imune (PubMed:7504305, PubMed:7531687, PubMed:7544004). Referências relacionadas: PMID:7504305 PMID:7531687 PMID:7544004
• Nos macrófagos, o NO medeia ações tumoricidas e bactericidas, contribuindo para a imunidade inata.
• Atua como uma peptidil-cisteína S-nitrosilase, mediando a S-nitrosilação de alvos citoplasmáticos, como PTGS2/COX2 (por similaridade) e GAPDH (PubMed:25417112). Como parte do complexo transnitrosilase iNOS-S100A8/9, nitrosila seletivamente a GAPDH na Cys-247, modulando a atividade do complexo GAIT e as respostas inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:25417112
• Aumenta a síntese dos mediadores pró-inflamatórios IL6 e IL8, amplificando ainda mais as cascatas inflamatórias (PubMed:19688109). Referências relacionadas: PMID:19688109
• Localiza-se predominantemente no citoplasma/citosol, onde interage com a calmodulina e outros cofatores para exercer sua atividade enzimática.
• Está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ubiquitinação, e requer vários cofatores, como heme, FAD, FMN, NADP e zinco, para sua função catalítica.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O peso molecular previsto é de 131 kDa; para Western blot, espera-se uma banda próxima desse tamanho. Utilize condições redutoras e valide com um controle positivo relevante (por exemplo, macrófagos RAW264.7 de camundongo estimulados com LPS/IFN-γ).
• Para imunofluorescência, fixe as células suavemente e considere a realização de uma co-coloração com um marcador citoplasmático. Verifique a expressão no seu sistema, pois a iNOS é induzível.
• Em aplicações de ELISA, assegure-se de que o par de anticorpos de captura/detecção seja compatível; a natureza monoclonal deste anticorpo pode proporcionar uma especificidade consistente.

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