Anticorpo policlonal de coelho anti-iNOS para WB e ELISA - P35228

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da iNOS

• A sintase do óxido nítrico induzível (iNOS), também conhecida como NOS2A, HEP-NOS ou NOS tipo II, é uma enzima dependente de cálcio/calmodulina que catalisa a produção de óxido nítrico (NO) a partir de L-arginina, com diversas funções de sinalização. Referências relacionadas: PMID:7504305, PMID:7531687, PMID:7544004
• Em macrófagos, o NO derivado da iNOS medeia ações tumoricidas e bactericidas, e a enzima também apresenta atividade de nitrosilase, catalisando a S-nitrosilação de cisteínas de alvos citoplasmáticos, como PTGS2/COX2. Referências relacionadas: PMID:25417112
• Como parte do complexo transnitrosilase iNOS-S100A8/9, a iNOS facilita a S-nitrosilação de GAPDH dependente de estímulo em 'Cys-247', influenciando a atividade do complexo GAIT e modulando alvos como ANXA5, EZR, MSN e VIM. Referências relacionadas: PMID:25417112
• A iNOS está envolvida na inflamação, aumentando a síntese de mediadores pró-inflamatórios como IL6 e IL8. Referências relacionadas: PMID:19688109
• Subcelularmente, a iNOS está localizada no citoplasma e no citosol, em concordância com sua função enzimática.
• A expressão tecidual foi relatada no fígado, na retina, nas células ósseas, nas células epiteliais das vias aéreas do pulmão e nos condrócitos; a proteína não é expressa em plaquetas. Referências relacionadas: PMID:7504305
• A iNOS pertence à família NOS e contém vários domínios de ligação a cofatores, incluindo FAD, FMN, heme e NADP, além de sítios regulatórios de ligação a cálcio/calmodulina e de fosforilação.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 974–1143 da iNOS humana (NP_000616.3), uma região C-terminal; este anticorpo policlonal pode reconhecer tanto formas completas quanto truncadas, mas recomenda-se a validação no sistema de amostra-alvo.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 131 kDa; os controles positivos podem incluir lisados de células de macrófagos RAW 264.7 (camundongo) ou THP-1 (humano) estimuladas com IFN-γ/LPS.
• Foi relatada reatividade cruzada com a iNOS de camundongo; para outras espécies, teste em modelos apropriados antes do uso rotineiro.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para detecção ou captura; recomenda-se otimizar a concentração de revestimento e as condições de bloqueio para obter a melhor relação sinal/ruído.

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