Anticorpo Policlonal Anti-Receptor de Insulina para WB, ELISA - P06213

Especificações e Parâmetros Essenciais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor de Insulina

• O receptor de insulina (IR) é uma tirosina-quinase receptora que medeia as ações pleiotrópicas da insulina, incluindo a regulação da captação de glicose, do crescimento celular e da diferenciação.
• Após a ligação da insulina, o IR fosforila os substratos do receptor de insulina (IRS1-4) e o SHC, ativando a via PI3K-AKT para efeitos metabólicos e a via Ras-MAPK para a expressão gênica e o crescimento celular.
• O IR existe em duas isoformas (Longa e Curta), resultantes de splicing alternativo; a isoforma Curta apresenta maior afinidade pelo IGF2, e os receptores híbridos com IGF1R exibem sensibilidades distintas aos ligantes. Referências relacionadas: PMID:12138094 PMID:16831875
• O receptor está localizado na membrana celular e, após a ativação, é internalizado para os endossomos tardios e lisossomos.
• As modificações pós-traducionais incluem autofosforilação, glicosilação e formação de ligações dissulfeto; trata-se de uma glicoproteína com atividade de tirosina-quinase.
• É expresso principalmente em tecidos responsivos à insulina (fígado, tecido adiposo e músculo esquelético), mas também em muitos outros tecidos; sua superexpressão é observada em vários tumores.
• Mutações no INSR estão associadas ao diabetes mellitus e a síndromes graves de resistência à insulina.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot, considere que o receptor de insulina é processado nas subunidades α (~135 kDa) e β (~95 kDa), resultando em múltiplas bandas dependendo das condições redutoras e da preparação da amostra.
• Valide a reatividade do anticorpo no seu tipo específico de amostra (por exemplo, lisados celulares e extratos de tecido) utilizando controles positivos e negativos apropriados, pois o peso molecular previsto do precursor não processado é de aproximadamente 156 kDa.
• Para ELISA, titule o anticorpo contra o receptor de insulina recombinante ou o receptor nativo para otimizar as concentrações de trabalho e inclua a validação da reatividade cruzada para amostras de camundongo e rato, conforme indicado.
• Como o imunógeno é um fragmento recombinante (aa 475-570), o anticorpo pode reconhecer tanto as formas precursoras quanto as processadas; confirme a especificidade por meio de competição com peptídeo ou de modelos de knockdown/knockout, se necessário.

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