Anticorpo Monoclonal Anti-Integrina alfa 4 (ITGA4/CD49d) para WB, IHC-P, ELISA - P13612

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Integrina alfa-4

• A integrina alfa-4 (ITGA4, CD49d) forma heterodímeros com a integrina beta-1 (ITGB1) para formar VLA-4, e com a integrina beta-7 para formar LPAM-1, servindo como receptores para fibronectina, VCAM1 e MADCAM1.
• Através do VLA-4, a ITGA4 reconhece a sequência Q-I-D-S na VCAM1, enquanto alfa-4/beta-7 reconhece a sequência L-D-T na MADCAM1, mediando o rolamento, a adesão firme e a transmigração de leucócitos.
• ITGA4:ITGB1 liga-se à fractalcina (CX3CL1) e pode atuar como seu correceptor na sinalização dependente de CX3CR1. Referências relacionadas: PMID:23125415
• ITGA4:ITGB1 liga-se à PLA2G2A através de um sítio distinto, induzindo mudanças conformacionais na integrina que aumentam a ligação ao ligando. Referências relacionadas: PMID:18635536, PMID:25398877
• Nas células do músculo liso vascular, ITGA4:ITGB1 reprime o influxo de canais de cálcio dependentes de voltagem tipo L mediado por PRKCA e a sensibilidade ao cálcio mediada por ROCK através da interação com SVEP1, inibindo a vasocontração. Referências relacionadas: PMID:35802072
• A ITGA4 é expressa na maioria dos leucócitos e é crítica para o tráfego de células imunes; também é expressa em células do músculo liso vascular ao nível proteico.
• A localização subcelular é principalmente na membrana plasmática como uma proteína de membrana tipo I de passagem única.
• Palavras-chave incluem splicing alternativo, adesão celular, integrina, receptor, cálcio, ligação a metal, fosfoproteína, glicoproteína e ligação dissulfeto, destacando seus papéis e regulação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno abrange a região C-terminal (aa 933-1032), espera-se que o anticorpo reconheça a proteína integrina alfa-4 de comprimento total (~115 kDa) no WB. Valide o tamanho da banda com marcadores de peso molecular apropriados e controles de carga.
• Para IHC-P, sugerimos testar métodos padrão de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato, pH 6.0) e otimizar protocolos de fixação para preservar epítopos de membrana.
• No ELISA, emparelhe com um anticorpo de captura/detecção apropriado e confirme a especificidade usando proteína ITGA4 recombinante ou lisados celulares.
• Dada a reatividade cruzada com camundongo, este anticorpo pode ser considerado para estudos em tecidos de camundongo; no entanto, recomendamos experimentos piloto para confirmar a reatividade no seu sistema modelo específico.
• Como as integrinas são glicosiladas e podem formar ligações dissulfeto, considere condições redutoras e não redutoras no WB para avaliar a possível dimerização.

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