Anticorpo Policlonal Anti-IRAK1 para WB, IF/ICC, ELISA - P51617

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IRAK1

• IRAK1 (quinase 1 associada ao receptor de interleucina-1) é uma quinase serina/treonina essencial para iniciar respostas imunes inatas, atuando como um mediador chave nas vias de sinalização do receptor Toll-like (TLR) e do receptor de IL-1.
• Após ativação do TLR/IL-1R, o IRAK1 é rapidamente recrutado pelo MYD88, fosforilado pelo IRAK4 e sofre autofosforilação, o que desencadeia eventos de sinalização a jusante.
• O IRAK1 fosforila as ligases de ubiquitina E3 Pellino (PELI1, PELI2, PELI3), promovendo a poliubiquitinação do próprio IRAK1, levando ao recrutamento do complexo IKK e subsequente translocação nuclear do NF-kB.
• Também fosforila o TIRAP para promover sua ubiquitinação e degradação, e fosforila diretamente o IRF7 para impulsionar a produção de interferon tipo I, estabelecendo um estado antiviral.
• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo e gotículas lipídicas; a sumoilação do IRAK1 facilita a translocação nuclear, onde ele fosforila o STAT3.
• Existem duas isoformas principais: a isoforma 1 é expressa mais fortemente que a isoforma 2, ambas presentes de forma ubíqua em tecidos humanos.
• O IRAK1 está envolvido em interações hospedeiro-vírus e sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, ubiquitinação e sumoilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 424-633 do IRAK1 humano, uma região conservada entre humano, camundongo e rato, suportando a reatividade cruzada observada.
• Para Western blot, considere usar lisados de células inteiras de células imunes estimuladas por TLR/IL-1R (por exemplo, THP-1, RAW264.7) para detectar bandas dependentes de ativação próximas a 77 kDa; a expressão basal pode variar.
• Em experimentos de IF/ICC, otimize as condições de fixação e permeabilização; o IRAK1 endógeno pode se localizar tanto no citoplasma quanto no núcleo, dependendo do tipo celular e estimulação.
• Para ELISA, o pareamento com um anticorpo de detecção correspondente (por exemplo, contra um epítopo diferente) pode melhorar a sensibilidade; valide na matriz de amostra relevante.
• Como um anticorpo policlonal, a variação entre lotes é possível; inclua controles positivos (por exemplo, células estimuladas) e negativos em cada ensaio.

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