Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-IRAK4 para WB, ELISA - Q9NWZ3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IRAK4

• A quinase associada ao recetor da interleucina-1 4 (IRAK4), também conhecida como antigénio de carcinoma renal NY-REN-64, é codificada pelo gene IRAK4 em humanos.
• Quinase serina/treonina-proteína que desempenha um papel crítico no início da resposta imune inata contra patógenos estranhos; envolvida nas vias de sinalização do recetor Toll-like (TLR) e IL-1R (PubMed:17878374). Referências relacionadas: PMID:17878374
• Após ativação do TLR, o IRAK4 é rapidamente recrutado pela MYD88 para formar o complexo Myddosome juntamente com o IRAK2, onde fosforila e estimula a atividade quinase do IRAK1.
• Fosforila proteínas ligases E3 de ubiquitina Pellino (PELI1, PELI2, PELI3) para promover a poliubiquitinação do IRAK1, permitindo a ligação de IKBKG/NEMO e a subsequente ativação do NF-kappa-B através do complexo IKK.
• Além disso, fosforila o TIRAP para promover a sua ubiquitinação e degradação, e regula a ativação da NADPH oxidase fosforilando o NCF1.
• A localização subcelular é citoplasmática.
• O splicing alternativo produz múltiplos isoformas; a proteína está associada a variantes de doença, como imunodeficiência (IMD67), e contém motivos essenciais para a quinase (ligação a ATP, magnésio, ligação a nucleótidos).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio (aminoácidos 1-200 do terminal N) abrange parte do domínio da quinase; o anticorpo pode detetar a proteína IRAK4 total com um peso molecular previsto de ~52 kDa.
• Validado por KD para Western blot, este anticorpo pode ser usado para confirmar a eficiência de knockdown ou detetar IRAK4 endógeno em lisados de células humanas.
• Para aplicações de ELISA, os formatos diretos ou de captura podem ser viáveis; os utilizadores devem otimizar as condições de revestimento e validar em sistemas de amostra relevantes.
• Considere usar linhas celulares imunes humanas (por exemplo, THP-1, Jurkat) estimuladas com agonistas de TLR para induzir a expressão de IRAK4 e avaliar a ativação da via.

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