Anticorpo Policlonal Anti-IRF3 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - Q14653

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IRF3

• O IRF3 é um regulador transcricional fundamental das respostas imunes dependentes do interferon tipo I (IFN), desempenhando um papel crítico na imunidade inata contra vírus de DNA e RNA. Referências relacionadas: PMID:22394562, PMID:24049179, PMID:25636800
• Ele regula a transcrição dos genes de IFN tipo I (IFN-alfa e IFN-beta) e dos genes estimulados por IFN (ISG) por meio da ligação a um elemento de resposta estimulado por interferon (ISRE) em seus promotores. Referências relacionadas: PMID:11846977, PMID:16846591, PMID:16979567
• O IRF3 é um ativador mais potente do gene IFN-beta (IFNB) do que do gene IFN-alfa (IFNA) e desempenha um papel crítico tanto nas fases inicial quanto tardia da indução dos genes IFNA/B. Referências relacionadas: PMID:16846591, PMID:16979567, PMID:20049431
• É encontrado em uma forma inativa no citoplasma de células não infectadas; após uma infecção viral, a presença de RNA de fita dupla (dsRNA) ou a sinalização do receptor semelhante a Toll (TLR), é fosforilado pelas cinases IKBKE e TBK1, induzindo uma alteração conformacional que leva à dimerização e à localização nuclear. Referências relacionadas: PMID:22394562, PMID:25636800, PMID:27302953
• No núcleo, o IRF3 associa-se à proteína de ligação ao CREB (CREBBP) para formar o fator 1 ativado por dsRNA (DRAF1), um complexo que ativa a transcrição dos genes de IFN tipo I e ISG. Referências relacionadas: PMID:16154084, PMID:27302953, PMID:33440148
• Em resposta à infecção pelo vírus Sendai, o IRF3 é recrutado para a mitocôndria e forma o complexo apoptótico TOMM70:HSP90AA1:IRF3:BAX, induzindo a apoptose. Referências relacionadas: PMID:25609812
• É expresso constitutivamente em uma variedade de tecidos.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação (crítica para a ativação), acetilação e ubiquitinação; o splicing alternativo gera isoformas adicionais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 100–200 do IRF3 humano (NP_001184051.1), uma região localizada no domínio de ligação ao DNA N-terminal; considere utilizar essa região para mapeamento de epítopos ou experimentos de bloqueio.
• Na transferência Western, espera-se uma banda de aproximadamente 47 kDa; valide em linhagens celulares relevantes infectadas por vírus ou estimuladas por IFN para confirmar a expressão.
• É relatada reatividade cruzada com o IRF3 de camundongo e rato; verifique a homologia da sequência na região do imunógeno ao utilizar essas espécies.
• Para aplicações de ChIP, otimize as condições de ligação cruzada e sonicação devido ao transporte nucleocitoplasmático dinâmico do IRF3.
• Para IF/ICC, utilize métodos apropriados de fixação e permeabilização para detectar a localização citoplasmática e nuclear.

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