Anticorpo Monoclonal Anti-IRF5 de Coelho para WB, IP, ELISA - Q13568

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da IRF5

• O fator regulador do interferão 5 (IRF5) é um fator de transcrição codificado pelo gene IRF5 (também conhecido como SLEB10). Pertence à família IRF e contém um domínio de ligação ao ADN que reconhece elementos de resposta estimulados por interferão (ISRE).
• A IRF5 atua como regulador central da imunidade inata, ativando a expressão de interferões de tipo I (IFN-α e IFN-β) e citocinas inflamatórias em resposta aos receptores Toll-like endossómicos TLR7, TLR8 e TLR9. Referências relacionadas: PMID:11303025 PMID:15695821 PMID:22412986
• Ela promove a transcrição de genes estimulados por IFN (ISGs) ao se ligar a ISRE em seus promotores, amplificando assim as respostas antivirais.
• A IRF5 é fundamental para a resposta ao interferão durante a infeção por SARS-CoV-2, pois regula a expressão de efetores antivirais. Referências relacionadas: PMID:33440148
• A localização subcelular da IRF5 é regulada dinamicamente; ela trafega entre o citoplasma e o núcleo, sendo a translocação nuclear essencial para sua atividade transcripcional.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, ubiquitinação (ligação isopeptídica) e conjugação do tipo ubiquitina, modulam a estabilidade e a atividade da IRF5.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, contribuindo para a diversidade funcional e a regulação tecidular específica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde ao domínio N-terminal de ligação ao ADN (aa 6-151) da IRF5 humana, o que indica que o anticorpo pode reconhecer essa região funcional; leve isso em consideração ao projetar experimentos de mapeamento de epítopos.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto da IRF5 é de aproximadamente 56 kDa; garanta uma separação adequada e use controles apropriados para confirmar a identidade da banda.
• A expressão da IRF5 é indutível após ativação de TLR em células imunes; considere tratar linhas celulares (por exemplo, THP-1, RAW 264.7) com agonistas de TLR para aumentar a detecção.
• Dada a reatividade cruzada relatada com camundongo, este anticorpo pode ser adequado para modelos murinos; no entanto, valide o desempenho no tecido ou tipo celular de interesse.
• Para imunoprecipitação (IP), verifique a eficiência de captura do anticorpo em sistemas de expressão excessiva ou endógena, pois a IRF5 pode interagir com outras proteínas.
• Em ELISA, pode ser necessário um par de anticorpos compatíveis; considere combinar com um anticorpo de detecção direcionado a um epítopo não sobreposto.

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