Anticorpo monoclonal anti-Islet1 para WB, IHC-P, ELISA - P61371

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Islet1

• A Islet1 (ISL1) é um ativador transcricional de ligação ao DNA que reconhece o motivo octâmero consenso 5'-ATAATTAA-3' nos promotores de genes-alvo, desempenhando um papel central nas redes regulatórias gênicas.
• É essencial para a diferenciação das células ganglionares da retina, onde coopera com o POU4F2 para alcançar a expressão máxima dos genes-alvo das RGCs.
• Juntamente com LHX3 e LDB1, a Islet1 está envolvida na especificação de neurônios motores.
• Liga-se a sequências intensificadoras (enhancer) do gene da insulina, contribuindo para o desenvolvimento das células das ilhotas pancreáticas (por similaridade).
• A Islet1 é um fator crítico no desenvolvimento cardíaco, marcando uma população de células progenitoras que contribui para o trato de saída, ventrículo direito e células atriais, sendo necessária para a migração e proliferação de progenitores cardíacos através do controle dos fatores de crescimento FGF e BMP.
• A localização subcelular é predominantemente nuclear.
• É expressa em subconjuntos de neurônios (medula adrenal, gânglio da raiz dorsal), camadas nuclear interna e ganglionar da retina, glândula pineal e regiões cerebrais específicas.
• Pertence à família LIM-homeodomínio; contém dois domínios LIM N-terminais (ligação a zinco) e um domínio homeobox de ligação ao DNA. As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno situa-se numa região central (aa 200-300) da Islet1 humana, que é bem conservada em camundongos, o que sustenta a reatividade cruzada observada; esta sequência também está presente em isoformas conhecidas, portanto, o anticorpo pode detectar múltiplas variantes de splicing se expressas.
• Para Western blot (WB), espere uma banda principal próxima a 39 kDa; condições redutoras e SDS-PAGE padrão são adequadas.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), prevê-se coloração nuclear; recomenda-se o teste preliminar de métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor em pH 6 ou 9) e titulação do anticorpo.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para detecção direta ou indireta do peptídeo imunizante ou da proteína de comprimento total; considere o pareamento com um anticorpo secundário adequado.
• Dada a natureza do desenvolvimento e a especificidade tecidual da Islet1, recomenda-se a validação da especificidade em controles positivos relevantes (por exemplo, tecido retinal ou cardíaco, culturas de neurônios motores) e controles negativos (knockout/knockdown de Islet1).

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