Anticorpo Policlonal Anti-ITCH para WB, IHC-P, ELISA - Q96J02

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ITCH

• ITCH (ligase E3 de ubiquitina de proteína homóloga a Itchy, também conhecida como AIP4, AIF4, ADMFD, NAPP1) é uma ligase E3 contendo o domínio HECT que aceita ubiquitina das enzimas E2 e a transfere diretamente para as proteínas substrato. Referências relacionadas: PMID:11046148, PMID:14602072, PMID:15051726
• Catalisa a conjugação de poliubiquitina ligada por Lys-29, Lys-48 e Lys-63, crítica para o controle das vias de sinalização inflamatória; como parte de um complexo de edição de ubiquitina com TNFAIP3, TAX1BP1 e RNF11, a ITCH garante a ativação transitória de NF-kappa-B mediando a degradação de RIPK1. Referências relacionadas: PMID:17028573, PMID:18718448, PMID:19131965
• A ITCH regula a atividade transcricional de múltiplos fatores (por exemplo, JUN, JUNB, NFE2) e moléculas de resposta imune (por exemplo, MAVS, RIPK2) através da ubiquitinação, influenciando a produção de citocinas Th2, o desenvolvimento hematopoiético e a sinalização antiviral. Referências relacionadas: PMID:16387660, PMID:18718448, PMID:19592251, PMID:19881509
• Localizada na membrana celular, citoplasma, núcleo e membranas endossômicas, a ITCH medeia a classificação de receptores (por exemplo, CXCR4, FZD4) ubiquitinando componentes do ESCRT-0 e PI4K2A, ligando a ubiquitinação ao tráfego endocítico. Referências relacionadas: PMID:14602072, PMID:23146885, PMID:34927784
• A ITCH promove a apoptose e o equilíbrio redox visando TXNIP para ubiquitinação ramificada junto com UBR5, e medeia a sinalização antiapoptótica de EGF através da degradação de p15 BID. Referências relacionadas: PMID:20068034, PMID:20392206, PMID:29378950
• Inibe a replicação do vírus influenza A catalisando a ubiquitinação ligada por Lys-48 e a degradação proteassomal da proteína viral M1. Referências relacionadas: PMID:30328013
• A ITCH é amplamente expressa e sujeita a acetilação, fosforilação e splicing alternativo, com um peso molecular de aproximadamente 103 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Dado que o imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-155) da ITCH humana, este anticorpo policlonal provavelmente detecta a ITCH de comprimento total (~103 kDa), bem como isoformas potenciais em lisados de humano, camundongo e rato.
• Para WB, considere condições redutoras e valide a especificidade da banda usando linhagens de células de controle positivo (por exemplo, Jurkat, HeLa) e um controle negativo (knockdown por siRNA).
• Para IHC-P, otimize os métodos de recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo usando secções de tecido conhecidas por expressar ITCH.
• Em ELISA, teste formatos diretos ou de captura e confirme a reatividade com a proteína ITCH recombinante.
• Sempre inclua controles apropriados adaptados ao seu sistema experimental.

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