Anticorpo policlonal anti-ITGB3BP para IHC-P e ELISA - Q13352

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da ITGB3BP

• A ITGB3BP, também conhecida como proteína R do centrômero (CENPR), beta-3-endonexina e fator 3 de interação com receptores nucleares (NRIF3), é uma proteína multifuncional codificada pelo gene ITGB3BP.
• Atua como corregulador da transcrição, com funções de coativador e correpressor, interagindo com receptores nucleares, como os receptores X retinoides (RXRs) e os receptores do hormônio tireoidiano (TRs), e modulando a atividade do NF-kappa-B.
• A isoforma 1 medeia especificamente a coativação dependente de ligante dos RXRs e TRs, sem afetar os receptores de ácido retinoico, vitamina D, progesterona ou glicocorticoides.
• Desempenha um papel na apoptose, induzindo a morte celular mediada pela caspase-2 em células de câncer de mama, mas não em outros tipos de câncer, envolvendo a permeabilização da membrana mitocondrial.
• Atua como componente do complexo CENPA-CAD nos centrômeros, contribuindo para a montagem do cinetócoro, a progressão mitótica e a segregação cromossômica; pode facilitar a incorporação de CENPA recém-sintetizada aos centrômeros.
• A localização subcelular inclui o núcleo (centrômero, cinetócoro), o citoplasma e potencialmente ambos os compartimentos, refletindo seus papéis duplos na transcrição e na segregação cromossômica.
• É amplamente expressa, com níveis elevados nos testículos e no cólon; a isoforma 4 é encontrada especificamente em plaquetas, linfócitos e granulócitos.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e ubiquitinação (ligação isopeptídica), e a proteína está sujeita a splicing alternativo.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-111) da ITGB3BP humana. Essa região pode detectar múltiplas isoformas; no entanto, a expressão específica de cada isoforma deve ser verificada na amostra-alvo.
• Para IHC-P, otimize as condições de recuperação antigênica (por exemplo, recuperação de epítopos induzida por calor em pH 6 ou 9) e a diluição do anticorpo. Valide a especificidade da coloração utilizando controles teciduais positivos e negativos apropriados.
• Em aplicações de ELISA, considere o uso de um controle positivo (por exemplo, proteína recombinante ou lisado celular) para confirmar a ligação e inclua um ensaio de competição com peptídeo bloqueador para avaliar a especificidade.
• O peso molecular previsto é de 20 kDa. Ao adaptar este anticorpo para western blotting, confirme se a banda observada corresponde ao tamanho esperado e considere a possibilidade de modificações pós-traducionais ou isoformas.
• Este anticorpo policlonal pode apresentar reatividade cruzada entre espécies com camundongo e rato, mas o desempenho deve ser validado empiricamente na espécie e aplicação desejadas.

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