Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-ITIH3 para WB, ELISA - Q06033

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ITIH3

• ITIH3 (Cadeia pesada H3 do inibidor inter-alfa-tripsina) também é conhecido como proteína associada ao hialuronano derivada do soro (SHAP) e é codificado pelo gene ITIH3. Pertence à família do inibidor inter-alfa-tripsina (ITI).
• O ITIH3 pode funcionar como um carreador de hialuronano (HA) no soro ou como uma proteína de ligação que conecta o HA a outras proteínas da matriz, incluindo proteínas da superfície celular, regulando assim a localização, síntese e degradação do HA — processos críticos para a migração celular e remodelação tecidual.
• A proteína é secretada e contém domínios de cadeia pesada que permitem ligação covalente ao hialuronano via uma ligação éster de serina, formando complexos covalentes com o HA.
• O ITIH3 é classificado como um membro da família dos inibidores de serina protease (serpina), embora seu papel principal seja na organização da matriz extracelular, em vez de inibição de protease; ele apresenta um peptídeo sinal e múltiplos sítios de glicosilação.
• O splicing alternativo do ITIH3 produz múltiplos isoformas, que podem ter distribuição tecidual e propriedades funcionais distintas.
• Modificações pós-traducionais importantes incluem glicosilação N-ligada, que influencia a estabilidade e função da proteína.
• A proteína tem um peso molecular previsto de ~99,8 kDa, consistente com a banda observada de ~100 kDa no western blot; é expressa no fígado e secretada no plasma, com ampla distribuição tecidual devido ao seu papel no metabolismo do hialuronano.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 35-180 do ITIH3 humano (NP_002208.3), uma região provavelmente conservada entre espécies, suportando a reatividade cruzada relatada com camundongo e rato.
• Para western blot (WB), considere uma faixa de diluição inicial de 1:500–1:2000, embora a diluição ideal deva ser determinada empiricamente no sistema de amostra alvo. Espera-se uma banda próxima a 100 kDa; bandas adicionais podem refletir isoformas ou complexos.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de detecção ou captura; faça titulação para estabelecer concentrações de trabalho para formatos diretos ou sanduíche.
• Como o ITIH3 é uma proteína secretada, soro, plasma ou sobrenadante de cultura celular podem ser tipos de amostra adequados. Etapas de pré-limpeza ou enriquecimento podem melhorar a detecção.
• Valide o desempenho do anticorpo na aplicação e espécie de interesse específicas com controles positivos e negativos apropriados.

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