Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-JAK1 para WB e ELISA - P23458

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do JAK1

• JAK1 (JTK3; JAK1A) é uma tirosina quinase não receptora de 133 kDa que pertence à família das quinases Janus e contém domínios SH2 e quinase, juntamente com atividades de tirosina-proteína quinase e transferase.
• Fosforila e ativa subunidades transdutoras de sinal de vários receptores de citocinas, incluindo IL-2, IL-10, IL-6, IL-31, IFN-alfa/beta/gama e complexos receptores de oncostatina-M, iniciando assim o recrutamento e sinalização de proteínas STAT. Referências relacionadas: PMID:11909529, PMID:12133952, PMID:15194700, PMID:16239216, PMID:28111307, PMID:32750333, PMID:7759950, PMID:8232552, PMID:9188471
• Após a ligação do interferon, o JAK1 fosforila o IFNAR2, criando sítios de ancoragem para proteínas STAT que então se tornam fosforiladas e translocam para o núcleo para ativar a transcrição. Referências relacionadas: PMID:7759950, PMID:16239216, PMID:32750333, PMID:8232552
• Além da sinalização por interferon, o JAK1 é necessário para a fosforilação de STAT3 induzida por humanina/MT-RNR2, ativação de STAT3 induzida por CNTF/CLCF1 via LIFR/IL6ST, sinalização de oncostatina-M através de receptores tipo I e II, e sinalização de Interleucina-31 através do complexo OSMR/IL31RA. Referências relacionadas: PMID:27384491, PMID:11294841, PMID:9188471, PMID:15194700
• Subcelularmente, o JAK1 está associado ao sistema endomembranar, consistente com seu papel na sinalização do receptor de citocinas na membrana plasmática e compartimentos intracelulares.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e ubiquitinação (conjugação Ubl); o domínio quinase requer ATP e íons metálicos (Mg²⁺) para atividade, e a proteína apresenta um domínio SH2 e resíduos de fosfotirosina.
• Dados de especificidade tecidual indicam maior expressão em tumores primários de cólon do que em tecido normal de cólon, com tumores metastáticos mostrando níveis de expressão comparáveis ao tecido normal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo sintético correspondente aos aa 600-700 do JAK1 humano (P23458), uma região que pode fazer parte do domínio pseudokinase ou do ligador interdomínio; considere verificar a especificidade do anticorpo por competição com peptídeo ou validação por nocaute.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é ~133 kDa; otimize os controles de carga e condições de bloqueio para minimizar a ligação inespecífica, especialmente em imunoprecipitação ou lisados complexos.
• No ELISA, certifique-se de que o antígeno de revestimento apresente o epítopo de forma eficaz; teste uma faixa de diluições do anticorpo para determinar a relação sinal-ruído ideal.
• Reatividade cruzada com camundongo e rato é esperada com base nos dados do fornecedor, mas a validação em lisados de células ou tecidos específicos da espécie é aconselhada.

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