Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-JNK1 para WB, IF, IHC, ELISA - P45983

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do JNK1

• A proteína quinase 8 ativada por mitógeno (JNK1), codificada pelo gene MAPK8, é uma quinase serina/treonina ativada por estresse que funciona como um componente-chave da cascata de sinalização da quinase N-terminal c-Jun (JNK). Também é conhecida como SAPK1c e JNK-46.
• Após ativação por fosforilação dupla pelas quinases a montante MAP2K4/MKK4 e MAP2K7/MKK7, o JNK1 transloca para o núcleo e fosforila fatores de transcrição como c-Jun e ATF2, regulando assim a expressão gênica dependente de AP-1. Referências relacionadas: PMID:18307971
• O JNK1 promove a apoptose induzida por estresse ao fosforilar proteínas-chave, incluindo p53 e YAP1, conectando o estresse celular à morte celular programada. Referências relacionadas: PMID:21364637
• Sob condições de inanição, o JNK1 fosforila o BCL2, causando sua dissociação do BECN1 e subsequente ativação da autofagia. Referências relacionadas: PMID:18570871
• O gene JNK1 sofre splicing alternativo para produzir múltiplas isoformas (alfa-1, alfa-2, beta-1, beta-2) que exibem diferentes preferências de ligação para substratos a jusante; por exemplo, a beta-1 liga-se preferencialmente a c-Jun, enquanto alfa e beta-2 mostram ligação de baixo nível semelhante a c-Jun e ATF2.
• O JNK1 localiza-se predominantemente no citoplasma e no núcleo, e também foi encontrado em sinapses em células neuronais, consistente com seus papéis no neurodesenvolvimento e função sináptica.
• O JNK1 participa de diversos processos fisiológicos, incluindo a regulação do ritmo circadiano pela fosforilação do complexo CLOCK-BMAL1, diferenciação de células T e migração neuronal. Referências relacionadas: PMID:22441692

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi projetado contra os resíduos 245–345 dentro do domínio quinase do JNK1 humano, uma região altamente conservada entre espécies, o que sustenta a reatividade cruzada relatada com camundongo e rato. Pesquisadores podem considerar verificar a reatividade em seu sistema modelo específico.
• Para Western blotting, uma banda predominante em torno de 48 kDa é esperada. Inclua controles positivos e negativos apropriados; lisados de células inteiras de células estressadas ou estimuladas (por exemplo, HeLa tratada com UV) podem aumentar o sinal devido à estabilização induzida por ativação.
• Em imunocitoquímica/imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), padrões de coloração nuclear e citoplasmática são esperados. Para tecidos neuronais, a localização sináptica também pode ser observada. Otimize as condições de fixação e permeabilização para cada tipo de amostra.
• Como este anticorpo reconhece o JNK1 total, a detecção da forma ativada (fosforilada) requer anticorpos fosfo-específicos separados. Recomenda-se executar blots paralelos ou coloração multiplex para distinguir estados de ativação.
• Para aplicações de ELISA, considere usar o anticorpo como reagente de captura ou detecção contra JNK1 recombinante ou lisados celulares, emparelhando com um anticorpo não competidor para formatos sanduíche.

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