Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-JNK1/JNK3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P45983 / P53779

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do JNK1/JNK3

• A proteína quinase 8 ativada por mitógenos (MAPK8), também conhecida como JNK1, é uma serina/treonina quinase que atua como componente central da via de sinalização da proteína quinase ativada por estresse/c-Jun N-terminal kinase (SAP/JNK), ativada por estresses extracelulares e citocinas pró-inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:28943315
• Após a ativação, o JNK1 fosforila e regula fatores de transcrição AP-1, como JUN, JDP2 e ATF2, controlando assim programas de expressão gênica envolvidos na proliferação, diferenciação e sobrevivência celular. Referências relacionadas: PMID:18307971
• Em resposta ao estresse, o JNK1 promove a apoptose ao fosforilar reguladores críticos como p53/TP53 e a proteína associada a Yes YAP1, e medeia a fosforilação de BAD para a sobrevivência de células eritroides, bem como a fosforilação de BCL2 induzida por inanição que desencadeia a autofagia. Referências relacionadas: PMID:21364637, PMID:21095239, PMID:18570871
• O JNK1 fosforila o heterodímero CLOCK-BMAL1, desempenhando um papel direto na regulação do relógio circadiano. Referências relacionadas: PMID:22441692
• Uma função pró-inflamatória chave envolve a fosforilação de NLRP3, que promove a montagem do inflamassoma NLRP3. Referências relacionadas: PMID:28943315
• Sob estresse oxidativo, o JNK1 visa vários substratos, incluindo EIF4ENIF1 para a montagem de corpos P, SIRT6 para estimular sua atividade mono-ADP-ribosiltransferase, e ALKBH5 para aumentar sua SUMOilação e inativação. Referências relacionadas: PMID:22966201, PMID:27568560, PMID:34048572
• O JNK1 localiza-se no citoplasma, núcleo e sinapse, e o splicing alternativo produz múltiplas isoformas (alfa-1, alfa-2, beta-1, beta-2) com propriedades distintas de ligação a substratos, ajustando finamente os eventos de sinalização a jusante.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região N-terminal (aa 1–383) do JNK1, o que pode detectar múltiplas isoformas e formas fosforiladas e não fosforiladas; no entanto, mudanças de mobilidade dependentes de ativação e a presença de reatividade cruzada com JNK3 devem ser consideradas ao interpretar padrões de bandas.
• Para Western blot, espere bandas em torno de 46–48 kDa, com possíveis sinais inferiores adicionais refletindo isoformas ou produtos de degradação; inclua controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, lisados expressando JNK2 vs. deficientes em JNK2) para confirmar a especificidade.
• Em IHC-P e IF/ICC, protocolos padrão de fixação e recuperação de antígeno podem ser aplicados; no entanto, as condições ideais devem ser determinadas empiricamente para cada tecido ou tipo celular, e a ausência de reatividade cruzada com JNK2 pode ser utilizada para distinguir a localização específica de JNK1/3.
• Como o anticorpo não reconhece JNK2, ele é adequado para experimentos onde é necessária a discriminação entre JNK1/3 e JNK2, como em estudos paralelos de knockdown ou superexpressão.
• Considere estimular as células com anisomicina ou tratamento com UV para induzir a ativação do JNK e validar a capacidade do anticorpo de detectar mudanças de sinalização induzidas por estresse.

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