Anticorpo Policlonar de Coelho Anti-Calistatina (SERPINA4) para WB - P29622

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Calistatina

• A calistatina, também conhecida como Serpina A4, inibidor de peptidase 4 (PI-4) ou inibidor de calicreína, é um membro da superfamília dos inibidores de serina protease (serpinas) codificada pelo gene SERPINA4.
• Ela atua como um inibidor específico da calicreína tecidual, bloqueando suas atividades amidolítica e cininogenase. Essa inibição envolve a formação de um complexo equimolar estável ao calor e ao SDS entre o inibidor e a enzima.
• Durante a inibição, a alça do sítio reativo da calistatina é clivada pela calicreína tecidual, gerando um pequeno fragmento C-terminal. Essa clivagem é um mecanismo típico da inibição de proteases mediada por serpinas.
• A calistatina é uma glicoproteína secretada, conforme indicado pela sua localização subcelular (secretada) e anotação por palavras-chave (glicoproteína, peptídeo sinal).
• A proteína é expressa predominantemente pelo fígado e secretada no plasma, o que é consistente com seu papel na regulação da atividade da calicreína circulante.
• Palavras-chave destacam sua classificação como inibidor de serina protease, glicoproteína e proteína secretada, com evidência experimental a partir de sequenciamento direto de proteínas e identificação por proteômica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 178–427) cobre uma grande região interna da proteína, reconhecendo provavelmente múltiplos epítopos. Esse desenho pode fornecer detecção robusta em condições desnaturantes e nativas.
• Para Western blot, espere uma banda em torno de 49 kDa (conforme indicado) em amostras que expressam SERPINA4, como tecido hepático ou plasma. Valide a especificidade usando controles positivos e bloqueio apropriado.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), considere que a calistatina é secretada, então a coloração intracelular pode ser limitada. Otimize a fixação e permeabilização para detectar pools citoplasmáticos ou intermediários da via secretora.
• Para aplicações em ELISA, esse anticorpo policlonal pode ser usado tanto como reagente de captura quanto de detecção após otimização empírica das concentrações de trabalho e pareamento com anticorpos secundários adequados.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato sugere utilidade em modelos roedores; no entanto, valide o desempenho específico da espécie no seu sistema experimental.

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