Anticorpo policlonal anti-KAT5/Tip60 para WB, IF/ICC, ELISA - Q92993

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de KAT5/Tip60

• Subunidade catalítica do complexo NuA4 de acetiltransferase de histonas, que acetila as histonas H2A e H4, promovendo a ativação transcricional, o reparo do DNA, a apoptose e a regulação do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:12776177, PMID:14966270, PMID:15042092, PMID:17709392, PMID:19783983, PMID:32832608
• Essencial para o reparo de quebras de fita dupla por recombinação homóloga: acetila H2A na Lys-15 (H2AK15ac) para bloquear o recrutamento de 53BP1 e acetila H2AX na Lys-5 para promover a montagem de NBN. Referências relacionadas: PMID:27153538, PMID:32832608, PMID:17709392, PMID:26438602
• Acetila substratos não histônicos, incluindo ATM, p53, FOXP3, BMAL1, ULK1, RAN, NDC80 e AURKB, associando sua atividade à sinalização de danos no DNA, à autofagia, à mitose e aos ritmos circadianos. Referências relacionadas: PMID:16141325, PMID:17360565, PMID:24835996, PMID:30704899, PMID:29040603, PMID:30409912, PMID:26829474
• Além da acetilação, KAT5 pode catalisar a crotonilação, a lactilação e a 2-hidroxi-isobutirilação de proteínas, adicionando camadas de regulação pós-traducional durante a mitose e o reparo do DNA. Referências relacionadas: PMID:29192674, PMID:34608293, PMID:38961290
• Durante a mitose, KAT5 localiza-se nos centrômeros e cinetócoros, onde acetila AURKB, RAN e NDC80 para garantir a segregação cromossômica precisa e a ligação aos microtúbulos. Referências relacionadas: PMID:26829474, PMID:29040603, PMID:30409912
• Localiza-se no núcleo, nos cromossomos, nos centrômeros, nos polos do fuso e no citoplasma, em consonância com seus papéis multifuncionais na transcrição, no reparo e na divisão celular.
• Contém um domínio de dedo de zinco e está sujeito a fosforilação, acetilação e ubiquitinação; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Este anticorpo policlonal de coelho é produzido contra a região N-terminal (aa 1-230) de KAT5 humano, que é conservada entre humanos, camundongos e ratos; espere uma ampla reatividade. Valide-o no sistema de amostra relevante.
• Para Western blot, espera-se uma banda próxima de 59 kDa; os níveis de expressão endógena podem variar entre linhagens celulares e tecidos. Portanto, considere utilizar controles positivos, como lisados de HeLa ou Jurkat.
• Na imunofluorescência/ICC, os padrões de coloração nuclear e/ou citoplasmática são consistentes com as localizações relatadas; valide-os utilizando métodos adequados de fixação e permeabilização para sua amostra.
• O anticorpo foi testado em ELISA; para ensaios quantitativos, realize uma titulação e inclua controles negativos apropriados.
• Como KAT5 sofre múltiplas modificações pós-traducionais, o peso molecular detectado pode variar dependendo das condições de tratamento; considere o uso de inibidores de fosfatase caso sejam de interesse as alterações de banda dependentes de fosforilação.

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